采用偏振光显微镜分析人卵透明带与胚胎发育潜能的关系

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目的:在体外受精与胚胎移植助孕技术(IVF-ET)中,影响妊娠率最直接的因素是移植胚胎的质量。目前国内外均采用胚胎的形态学评分评价胚胎的质量,但有一定局限性[1]。因此研究者致力于寻找新的方法完善现有的评分系统。本研究通过使用偏振光显微镜(polarized light microscope, Polscope)观察并测量人卵透明带密度(Zona pellucida density, ZPD)、厚度(Zona pellucida thickness, ZPT),分析透明带结构与卵子及胚胎发育潜能的关系。方法:选择2006年12月-2007年6月间采用卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)方式助孕的体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)周期,ICSI前卵子在偏振光显微镜下摄像,图像保存后使用OosightTM软件对49个周期的267个卵子进行透明带厚度和密度分析。实验分组:42个周期于受精后D3移植胚胎,7个周期因卵巢过度刺激综合症或宫腔积液等原因取消移植。根据卵子是否有第一极体排出分为成熟卵子组(267个卵子)和未成熟卵子组(23个卵子,包括MI, GV期);将成熟卵子按患者年龄分为<37岁组(243个卵子)和≧ 37岁组(24个卵子);所有卵子根据受精后胚胎质量分为优质胚胎组(73个卵子)和劣质胚胎组(51个卵子);按临床妊娠结局分为妊娠组(22个周期,48个卵母细胞)、未妊娠组(20个周期,42个卵母细胞)。结果:(1)成熟卵子透明带内层ZPD平均值(2.22±0.52 nm),ZPT平均值(8.27±1.83μm),及全层ZPT平均值(16.61±2.37μm)各项都明显低于未成熟卵ZPD平均值(2.94±0.6nm),ZPT平均值(9.59±1.43μm),及全层ZPT平均值(18.25±2.15μm)。(2)年龄<37岁组与≧ 37岁组卵子比较,两组间各层ZPD、ZPT及全层ZPT均无显著差异;(3)优质胚胎组卵子全层ZPT(15.96±2.21μm)显著低于劣质胚胎组(16.89±2.34μm),P<0.05,卵子各层透明带的密度和厚度均无显著性差异;( 4 )妊娠组卵子内层ZPD(2.02±0.47nm)低于未妊娠组(2.24±0.57nm)、全层ZPT(15.97±2.45μm)低于未妊娠组(17.09±2.46μm),差异有显著性,P<0.05。结论:(1)偏振光显微镜能够检测透明带厚度和密度,透明带在Polscope下显示为密度和厚度不同的3层,内层最亮,密度最大,外层次之,中间层最暗,是内外两层的过渡区域;(2)卵子透明带结构能够反应卵子、胚胎的质量,而且与妊娠率有相关性,能够预测卵子及胚胎的发育潜能;(3)成熟度不同的卵子,透明带的厚度和密度不同。
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