长角血蜱雌蜱唾液腺蛋白质及激素调控的研究

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蜱类是专性吸血的外寄生节肢动物,传播多种人、畜疾病,给人类健康和畜牧业发展带来极大危害。唾液腺是蜱体内的一个重要器官,在其生命活动中起重要作用。它不仅能维持体内离子、水分平衡,使蜱成功吸血,而且又是各类疾病传播的窗口。因此,对其研究具有重要的理论和实践意义。 本文以广泛分布于我国的长角血蜱Haemaphysalis longicornis Neumann雌蜱为研究对象,利用生物化学、激素研究和蛋白质组学等现代生物学前沿技术对不同发育期唾液腺蛋白质的动态变化、保幼激素和蜕皮激素对唾液腺是否有影响等方面进行了较为系统的研究,并对雌蜱唾液腺蛋白质组进行了初步分析,填补了该领域中的不足,为深入开展蜱类唾液腺研究提供了依据。主要研究结果如下: 1.唾液腺蛋白含量在不同发育期发生变化。饥饿期蛋白含量低(9.51 μg/tick);吸血2d蛋白含量急剧增加(34.90 μg/tick);交配期达到峰值(84.40 μg/tick),约为饥饿期的8.8倍;饱血后蛋白含量明显下降,饱血后2d和饱血后4d的含量分别为39.47 μg/tick和20.54 μg/tick。 饥饿雌蜱唾液腺有17条蛋白带;吸血2d增至23条;交配后达到26条,直至饱血后4d保持不变,吸血和交配均能刺激新蛋白的合成。各期唾液腺蛋白中有主带10条,分子量分别为192 kDa、158 kDa、136 kDa、133 kDa、129 kDa、97 kDa、84 kDa、74 kDa、45 kDa和32 kDa,主带在不同发育期发生增加、缺失和量的变化。 2.保幼激素(JH Ⅲ)对雌蜱唾液腺蛋白含量和成分有作用,并随发育期和剂量的不同而产生不同效应。吸血2d用JH Ⅲ处理,10μg剂量使交配期唾液腺蛋白含量明显增加,10μg、50μg和100μg剂量抑制112 kDa蛋白基因的表达;饱血当天处理,10μg、50μg和100μg剂量均能显著提高饱血后2d唾液腺蛋白含量,100μg剂量使28 kDa蛋白基因表达和67 kDa蛋白基因上调表达,高剂量200μg和400μg使236 kDa和112 kDa的蛋白缺失;饱血当天处理,1μg和10μg剂量均能显著提高饱血后4d雌蜱唾液腺蛋白含量,400μg剂量则显著降低饱血后4d雌蜱唾液腺蛋白含量,100μg、200μg和400μg
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