组蛋白H3乙酰化介导TGFβ2上调H9C2细胞转录因子的研究

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目的:探讨转化生长因子β2(transforming growth factor beta2,TGFβ2)对大鼠胚胎心肌细胞H9C2心脏发育相关核心转录因子Mef2c和GATA4表达的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系。材料与方法:比较TGFβ2对细胞生长的影响。利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏发育相关核心转录因子Mef2c和GATA4mRNA的相对表达量,筛选合适的TGF-β2干预浓度。采用Western blot检测H9C2细胞组蛋白H3乙酰化水平乙酰化H3(acetylated histone H3,acH3)的差异。染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)Real-timePCR检测Mef2c和GATA4启动子区与acH3结合DNA的相对表达水平。比色分析法检测TGF-β2对心肌细胞的总体组蛋白乙酰化酶(histoneacetyltransferase,HATs)活性的影响。结果:①TGF-β2干预组相对于对照组心肌细胞的增殖能力增强(P<0.05)。②心肌细胞的心脏相关转录因子Mef2c和GATA4mRNA的相对表达量随着TGF-β2浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在5μg/L的浓度时均达到最高,Mef2c mRNA相对表达量是对照组的1.8倍,GATA4mRNA是对照组的2.3倍(P<0.05)。③T GF-β2干预72h后acH3水平是对照组的4倍(P <0.05),HATs活性是对照组的1.34倍(P <0.05)。④TGF-β2干预组Mef2c和GATA4启动子区组蛋白H3的乙酰化水平分别是对照组的2.56和2.16倍(P <0.05)。结论:TGF-β2可以促进心肌细胞H9C2的分裂与增殖,并上调心脏相关转录因子Mef2c和GATA4的表达,该作用可能由组蛋白H3乙酰化介导。
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