本文以产于浙江北部的黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)为实验材料,利用菌种分离、液体深层发酵、PCR、柱层析、纸层析、紫外光谱、高效液相色谱技术和化学反应等手段,对黑柄炭角菌的生物学特性、液体发酵的培养条件以及部分生物活性成分进行了研究,主要内容包括:黑柄炭角菌培养的营养因子以及环境条件的摸索,液体培养基及培养条件的筛选,发酵罐深层发酵曲线的测定,黑柄炭角菌菌索、菌丝及菌核的ITS序列分析、菌丝体多糖的分离纯化及结构的鉴定,黑柄炭角菌菌丝多糖的提取的条件优化,甘露醇的提取及含量分析,发酵菌丝、菌索以及菌核核苷的含量分析,实验结果如下: 1.优化筛选出了黑柄炭角菌最适合的固体培养基和最佳的培养条件。黑柄炭角菌对葡萄糖、果糖的利用效果较好:黄豆粉、花生粉、蚕蛹粉是良好的氮源;柠檬酸对菌丝体生长有促进作用;黑柄炭角菌是一种中温性真菌,在22℃-30℃下均能够生长,但最适合的温度是25℃-26℃;菌丝在pH值为5.0-8.0之间均能够生长,但是以6.0左右为最佳。 2.优化筛选出了黑柄炭角菌菌丝体最适液体种子培养基和最佳培养条件,培养基配方为:土豆20%、蛋白胨5%、蚕蛹粉10%、葡萄糖20%、硫酸镁1%、磷酸二氢钾0.5%、磷酸氢二钾1%、硫酸锌1%、柠檬酸1%。 3.测定了黑柄炭角菌菌丝体发酵罐深层发酵的生长曲线,确定发酵周期以66h为宜,并根据其生长规律,将其分为四个典型生长时期:生长延迟期、生长对数期、生长稳定期及衰老期。 4.运用PCR扩增技术了黑柄炭角菌菌索、试管培养菌丝、发酵菌丝以及菌核的完整的ITS区(ITS1+5.8S+ITS2),并通过序列测定,通过对比发现前三者的PCR扩增产物电泳图谱及整个碱基序列完全一致,可证明本文分离得到的黑柄炭角菌菌株以及发酵菌丝与原始采回的菌株为同一菌种。且其与菌核的ITS序列的一致性为87.91%,