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目的:1.研究miR-203-3p对TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的影响;2.验证miR-203-3p抑制TLR4-Myd88-NF-κB信号通路调控巨噬细胞极化;3.验证miR-203-3p通过调控M2巨噬细胞极化下调小鼠成纤维细胞TGF-β/Smad信号通路抑制肌成纤维细胞活化。方法:1.通过双荧光素酶报告基因系统验证miR-203-3p可以与TLR4 m RNA的3’-UTR特异性结合,通过实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测小鼠巨噬细胞RAW264.7转染了mmu-miR-203-3p mimics、mimic NC后TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。2.将mmu-miR-203-3p mimics或mimic NC转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后,通过Real-time PCR及Western blot检测小鼠巨噬细胞RAW264.7 M1型巨噬细胞markers（i NOS,TNF-α,IL-23,CCL3）,M2型巨噬细胞markers（Arg-1,CX3CR1,IL-4,MRC,IL-10,Ym1）的表达。并使用TLR4抑制剂TAK-242抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7 TLR4-Myd88-NF-κB信号通路后,将其转染mmu-miR-203-3p mimics,再次检测M1型巨噬细胞markers（i NOS,TNF-α,IL-23,CCL3）,M2型巨噬细胞markers（Arg-1,CX3CR1,IL-4,MRC,IL-10,Ym1）及TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。3.将小鼠巨噬细胞RAW264.7转染mmu-miR-203-3p mimics或mimic NC后与小鼠成纤维细胞BHK-21共培养,通过Real-time PCR及Western blot检测小鼠成纤维细胞BHK-21TGF-β,Smad3,Smad7以及α-SMA的表达。使用TLR4抑制剂TAK-242抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的TLR4-Myd88-NF-κB信号通路,将其转染mmu-miR-203-3p mimics后,与小鼠成纤维细胞BHK-21共培养,再次检测小鼠成纤维细胞BHK-21 TGF-β,Smad3,Smad7以及α-SMA的表达。结果:1.双荧光素酶报告基因系统显示293T细胞共转染pmir GLO-TLR4 3’-UTR质粒及mmu-miR-203-3p mimics后,其相对荧光素酶活性△CT较共转染pmir GLO-TLR4 3’-UTR质粒+mimic NC、pmir GLO-mut-TLR4 3’-UTR质粒+mmu-miR-203-3p mimics或者pmir GLO-mut-TLR4 3’-UTR质粒+mimic NC的293T细胞均有显著降低,其差异达到统计学意义（p＜0.05）,通过Real-time PCR、Western blot检测显示转染了mmu-miR-203-3p mimics的小鼠巨噬细胞,其TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达较转染了mimic NC及对照组的巨噬细胞明显降低（p＜0.05）,而转染了mimic NC与对照组的巨噬细胞其TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达未见明显差异（p＞0.05）。2.通过Real-time PCR及Western blot检测发现转染了mmu-miR-203-3p mimics的小鼠巨噬细胞RAW264.7与转染了mimic NC以及对照组的巨噬细胞相比,其M1型巨噬细胞markers（i NOS,TNF-α,IL-23,CCL3）表达明显降低,M2型巨噬细胞markers（Arg-1,CX3CR1,IL-4,MRC,IL-10,Ym-1）表达明显增高,其差异达到统计学意义（p＜0.05）。而当使用TLR4抑制剂TAK-242抑制TLR4-Myd88-NF-κB信号通路后,发现单独转染mmumiR-203-3p mimics的巨噬细胞与转染了mmu-miR-203-3p mimics并用TAK-242处理的巨噬细胞相比,其M1型巨噬细胞markers（i NOS,TNF-α,IL-23,CCL3）、M2型巨噬细胞markers（Arg-1,CX3CR1,IL-4,MRC,IL-10,Ym-1）表达未见明显差异（p＞0.05）,TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达同样未见明显差异（p＞0.05）。3.将转染了mmu-miR-203-3p mimics或mimic NC的小鼠巨噬细胞RAW264.7与小鼠成纤维细胞BHK-21共培养,通过Real-time PCR及Western blot检测发现与转染了mimic NC或者对照组巨噬细胞共培养相比,与转染了mmu-miR-203-3p mimics的巨噬细胞共培养后,小鼠成纤维细胞BHK-21 TGF-β、Smad3、α-SMA的表达明显减少,Smad7表达明显增高,其差异达到统计学意义（p＜0.05）。当使用TLR4抑制剂TAK-242抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的TLR4-Myd88-NF-κB信号通路后,Real-time PCR及Western blot检测发现小鼠成纤维细胞BHK-21与单独转染mmu-miR-203-3p mimics的巨噬细胞细胞和与转染了mmu-miR-203-3p mimics并用TAK-242处理的巨噬细胞共培养后,其TGF-β、Smad3、Smad7、α-SMA的表达未见明显差异（p＞0.05）。结论:1.miR-203-3p通过与TLR4 m RNA 3’-UTR特异性结合下调小鼠巨噬细胞RAW264.7TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。2.miR-203-3p通过抑制TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达调控巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化。3.miR-203-3p通过调控M2巨噬细胞极化下调小鼠成纤维细胞TGF-β/Smad信号通路抑制肌成纤维细胞活化。