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肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是一种常见的恶性肿瘤,多发于成人,肝癌的发生、发展和转移是一个复杂的过程,受多个因子和基因的调节[1]。微小核糖核酸RNA(MicroRNA,miRNA)是一类长度在19-24个核苷酸范围内的内源性非编码RNA,miRNA能够通过与靶基因mRNA3’ UTR互补结合来抑制翻译或者促进mRNA降解,从而调控相关基因的表达。大量研究报道称miRNA在许多肿瘤细胞中都存在差异性表达,并且在肿瘤的发生发展中都可能发挥着重要的作用。我们实验室前期的研究发现一定浓度的脐带间充质干细胞(Umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,UC-MSCs)条件培养基能够抑制肝癌细胞HepG2的增殖,并且通过高通量测序技术,分析了 UC-MSCs条件培养基共培养后HepG2 miRNAs的差异表达谱,找到了一些可能相关的miRNAs。其中miR-3065-5p和miR-1307-5p在UC-MSCs条件培养基处理HepG2后表达水平显著上调。首先,我们通过qRT-PCR检测了三种肝癌细胞系(HepG2、MHCC97-L、MHCC87-H)和正常肝细胞系L02中miR-3065-5p的表达是否存在差异;结果显示,相较正常肝细胞L02,miR-3065-5p在肝癌细胞系中的表达明显下调,接下来我们通过体外合成miR-3065-5p质粒转染三种肝癌细胞,结果发现过表达miR-3065-5p能够显著抑制三种肝癌细胞的增殖、侵袭、克隆形成能力。此外,我们通过生物信息学预测到SATB1可能是miR-3065-5p的相关靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验进一步检测了预测的可靠性,实验结果显示SATB1与miR-3065-5p存在互补结合位点。qRT-PCR与Western blot结果显示过表达的miR-3065-5p能够显著抑制SATB1表达水平。最后通过体外合成siRNA干扰SATB1在肝癌细胞中的表达,结果显示,干扰SATB1后也能显著抑制肝癌细胞的增殖,其效果与miR-3065-5p类似。在miR-1307-5p的研究中,我们发现过表达的miR-1307-5p也能显著抑制肝癌细胞的增殖、侵袭等生物学特性,而在靶基因的筛选验证中,我们通过生物信息学软件预测了 PIM3可能是miR-1307-5p的靶基因,但是双荧光素酶报告基因实验效果并不明显,说明PIM3并不是miR-1307-5p的相关靶基因,其靶基因有待进一步筛选验证。