论文部分内容阅读
目的:近年来，男性生殖能力普遍下降，环境因素直接影响男性生殖健康。丙烯酰胺（acrylamide）是环境和食品中有毒物质，对人类生殖健康产生严重影响。丙烯酰胺的生殖毒性可以导致男性不育，机制尚未完全清楚。活性氧(reactive oxygen species)越来越受到男性生殖医学工作者的重视，氧化应激损伤被认为是造成男性不育的重要病因之一。高浓度活性氧被认为能够诱发生精细胞DNA损伤和加速生精细胞的凋亡。XRCC1蛋白（X线修复交叉互补组1）是通过DNA碱基切除修复，特异性识别并切除5mC的糖苷酶(glycosylase)，切除5mC产生AP位点(apurinic/apyrimidinic site),进而启动碱基切除修复途径(BER)来实现DNA修复的。对于氧化和非氧化的DNA损伤，XRCC1通过BER途径与多聚ADP核糖聚合酶（PARP）、DNA连接酶Ⅲ及DNA多聚酶β作用来修复DNA,进而维持染色质的完整性,从而减少生精细胞凋亡。本研究通过对SD大鼠不同剂量的丙烯酰胺染毒，观察大鼠附睾中精子密度、畸形率和丙二醛(MDA)水平变化，进一步研究睾丸组织中XRCC1蛋白表达和生精细胞凋亡的变化以及相关性，探讨丙烯酰胺染毒时，对SD大鼠生精功能的影响及其可能的机制。方法：选择符合试验标准的成年健康雄性SD大鼠(体重150±10g)40只。自由饮双蒸水，适应性喂养1周后，随机分为四组，空白对照组及染毒低剂量组，中剂量组，高剂量组，每组10只，标准饲料喂养，以灌胃方式分别给予空白对照组双蒸水、低剂量组20mg/kg丙烯酰胺水溶液、中剂量组40mg/kg丙烯酰胺水溶液、高剂量组60mg/kg丙烯酰胺水溶液,灌胃体积10ml/kg,每天上午8时灌胃，每日1次，每周5次，连续2周后，取右侧附睾并测定附睾中精子密度及畸形率，同时测定精浆中丙二醛水平，取右侧睾丸组织组化法观察生精细胞XRCC1的表达,TUNEL法观察生精细胞的凋亡。采用SPSS13.0统计软件，单因素方差分析（one-wayANOVA）方法，两组间比较采用LSD法;以XRCC1蛋白表达与凋亡之间的关系做直线相关性分析,以α=0.05，P<0.05表示有显著性差异，P<0.01表示有极显著性差异。结果：随着染毒剂量的增加，大鼠体重和睾丸重量呈下降趋势，（P<0.05）各染毒组附睾中精子密度下降、精子畸形率及丙二醛水平（MDA）均明显升高，与对照组比较均有统计学意义（P<0.05），随染毒剂量的增加，精子密度下降显著，精子畸形率和丙二醛水平升高显著。各染毒组XRCC1蛋白表达下降，凋亡生精细胞增加，与对照组比较均有统计学意义（P<0.05），随染毒剂量的增加，睾丸生精细胞XRCC1蛋白表达下降显著，凋亡生精细胞升高显著。XRCC1蛋白表达下降及凋亡生精细胞升高呈现明显的剂量-效应反应关系。结论：随丙烯酰胺染毒剂量的增加，大鼠附睾精子密度下降，畸形率及丙二醛水平升高，其可能与氧化性损伤有关。同时睾丸生精细胞XRCC1蛋白表达下降，凋亡的生精细胞增加可能是影响丙烯酰胺染毒大鼠生精功能的一个重要机制。