[研究背景与目的]中医学的经方半夏泻心汤是辛开苦降法的代表方,被广泛用于治疗多种疾病,特别是在治疗消化道疾病方面疗效显著。通过生物数据库开展信息分析,发现半夏泻心汤中辛开药物对消化道疾病的治疗作用与5-羟色胺受体（5-HTR）、苦降药物与苦味受体（TAS2Rs）的关系最为密切。且5-HTR与TAS2Rs都广泛存在于消化道组织中,二者与胃肠运动、分泌、内脏感觉等有着密不可分的关系。基于中药复方通过多成分多靶点多环节发挥作用的这一理念,提出5-HTR和TAS2Rs在半夏泻心汤辛开苦降法治疗功能性消化不良的机制中扮演重要角色的猜想。为此,本研究基于5-HT4R/TAS2R38研究了半夏泻心汤辛开苦降法治疗功能性消化不良的作用机制。[研究方法]第一部分:通过文献分析中西医对于功能性消化不良的认识;Meta分析半夏泻心汤改善功能性消化不良及其相关症状的有效性和安全性。第二部分:观察低（4.03g/kg）、中（8.06g/kg）、高（16.12g/kg）不同剂量的半夏泻心汤在正常小鼠上的药效,计算胃排空率和小肠推进率,并采用Elisa检测血清中胃动素、胃饥饿素、生长抑素和血管活性肠肽,以探索药量和药效的关系。第三部分:（1）选择合适的功能性消化不良造模方法,探索半夏泻心汤在模型小鼠上的药效。首先根据查阅文献选择出常见的造模方法,将正常小鼠分为正常对照组、碘乙酰胺组、洛哌丁胺组、夹尾组、食醋组,构建功能性消化不良模型,观察小鼠的一般情况,检测胃肠动力、胃肠激素、HE染色等,据上述结果选择合适的造模方法。确定碘乙酰胺法符合功能性消化不良的特征。（2）将正常饲养的小鼠分为正常对照组、模型组、半夏泻心汤全方组、辛开组、苦降组、辛开苦降组,除正常对照组外,其余各组以碘乙酰胺法造模,造模后,各治疗组分别给予半夏泻心汤全方药、辛开药、苦降药、辛开苦降药,治疗14天,观察小鼠的一般情况,检测胃肠动力、胃肠激素、HE染色等来评估辛开、苦降的作用。第四部分:（1）将小鼠分为空白对照组、模型组、全方组、辛开组、辛开+哌波色罗组,除正常对照组外,其余各组以碘乙酰胺法造模,造模后,各治疗组分别给予半夏泻心汤全方药、辛开药、辛开药+哌波色罗,治疗14天,观察小鼠的一般情况、检测胃肠动力、胃肠激素、钙离子流式检测受体激活情况,WB、PCR、免疫组化、免疫荧光检测受体表达,通过分子对接找出辛开药物中可能起作用的单体成分,利用钙离子流式检测单体成分对受体的激活作用,MTT筛选安全给药浓度,Elisa检测辛开组药物单体对5-HT分泌的影响。（2）将小鼠分为空白对照组、模型组、全方组、苦降组、苦降+丙磺舒组,除正常对照组外,其余各组以碘乙酰胺法造模,造模后,各治疗组分别给予半夏泻心汤全方药、苦降药、苦降药+丙磺舒,治疗14天,观察小鼠的一般情况,检测胃肠动力、胃肠激素、钙离子流式检测受体激活情况,WB、PCR、免疫组化、免疫荧光检测受体表达,通过分子对接找出苦降药中可能起作用的有效单体成分,利用钙离子流式检测苦降组单体成分对受体的激活作用。第五部分在正常小鼠上利用5-HT4R/TAS2R38的激动剂验证两受体间的关系,检测胃肠动力和胃肠激素。[研究结果]第一部分通过理论研究发现半夏泻心汤辛开苦降的作用可能与5-HT4R/TAS2R38相关,半夏泻心汤可以有效的治疗功能性消化不良,改善患者症状。Meta分析结果显示有效率:RR=1.25,95%CI[1.19,1.32];综合症状评分:WMD=-1.90,95%CI[-2.53,-1.28];腹痛:WMD=-1.45,95%CI[-2.20,-0.69];腹胀:WMD=-0.79,95%CI[-1.01,-0.57];嗳气:WMD=-0.42,95%CI[-0.67,-0.16];反酸:WMD=-0.40,95%CI[-0.75,-0.04];胃半排空时间:MD=-10.19,95%CI[-14.79,-5.59];胃全排空时间:MD=-25.00,95%CI[-29.31,-20.69];胃蠕动幅度（短直径）:MD=0.25,95%CI[0.16,0.34];胃蠕动幅度（长直径）:MD=0.97,95%CI[0.89,1.05];胃蠕动频率:MD=1.07,95%CI[0.29,1.85];胃肥大细胞个数:MD=-5.15,95%CI[-7.69,-2.61];胆囊收缩素:MD=18.25,95%CI[10.61,25.89];胃动素MD=39.01,95%CI[30.35,47.66],研究发现半夏泻心汤可以有效地治疗功能性消化不良,改善腹痛、腹胀、嗳气等相关症状以及胃肠动力和胃肠激素水平,半夏泻心汤治疗功能性消化不良是一种较为安全的治疗方式。第二部分研究发现不同剂量的半夏泻心汤对小鼠体重、进食量、活动情况、胃排空率、小肠推进率均没有明显影响。中、高剂量组的半夏泻心汤均提高了血清中的胃动素和胃饥饿素,对生长抑素和血管活性肠肽没有明显影响。第三部分研究发现,（1）碘乙酰胺组、洛哌丁胺组、夹尾组和食醋组造模后小鼠的毛发杂乱无章,没有光泽,活动减少。其中碘乙酰胺、食醋组的胃排空率和小肠推进率较空白组出现了下降,夹尾提高了血清胃动素、血清胃饥饿素,食醋提高了小鼠的血清生长抑素,四种造模方法对血清中血管活性肠肽水平没有影响。HE染色结果显示各组均无炎症改变。因此选择了降低胃肠动力和对胃肠激素没有影响的碘乙酰胺法进行造模,此模型更符合功能性消化不良的特征。（2）造模后给予半夏泻心汤不同组分给药,发现各组药物对进食量和体重没有明显的影响,含有辛开组药物全方组、辛开组、辛开+苦降组、提高了功能性消化不良模型小鼠的胃排空率和小肠推进率,提高了血清中胃动素水平;含有苦降组药物成分的全方组、苦降组、辛开+苦降组均提高了血清中胃饥饿素水平,半夏泻心汤各组分药物对血清中的生长抑素和血管活性肠肽没有明显的影响,HE染色显示给药后没有造成小鼠胃肠道炎症性改变。第四部分通过抑制剂探究辛开组/苦降组与5-HT4R/TAS2R38的关系,（1）加入5-HT4R抑制剂哌波色罗以后,与辛开组相比,辛开+哌波色罗组降低了胃排空率、小肠推进率、血清中的胃动素水平,辛开组药物可以激活5-HT4R受体,辛开组药物对胃和小肠组织中的5-HT4R的表达没有明显影响,通过分子对接筛选出结合得分高的单体（葫芦巴碱、6-姜酚、原儿茶醛）不能激活5-HT4R受体,推测由辛开药中的其他成分激活5-HT4R受体,其中葫芦巴碱可以提高GES-1细胞5-HT的分泌。（2）加入TAS2R38抑制剂丙磺舒后,与苦降组相比,苦降+丙磺舒组对胃肠动力没有明显影响,降低了血清中胃饥饿素水平,通过钙离子流式检测发现苦降组药物可以激活TAS2R38,通过WB、PCR、免疫荧光、免疫组化发现苦降组药物提高了小肠组织TAS2R38蛋白水平的表达,不影响胃TAS2R38的蛋白水平、胃mRNA水平的表达和小肠mRNA水平的表达。通过分子对接筛选出结合得分高的单体（小檗碱、表小檗碱、小檗红碱、木兰花碱、非洲防己碱、黄芩中、黄芩苷、野黄芩苷）,其中小檗碱可以激活TAS2R38受体。第五部分利用5-HT4R和TAS2R38的激动剂验证了 5-HT4R/TAS2R38与胃肠动力和胃肠激素的关系,研究发现5-HT4R的激动剂可以提高胃排空率和小肠推进率,TAS2R38的激动剂对胃肠动力没有明显影响。5-HT4R激动剂莫沙必利提高了血清中胃动素水平,而苦味受体激动剂苯甲地那铵提高了血清中胃饥饿素水平。[结论与意义]本研究确证了半夏泻心汤在临床上可以有效地治疗功能性消化不良,改善相关症状、胃肠动力和胃肠激素水平且无明显不良反应。半夏泻心汤是一种调节机体平衡的方剂,对正常小鼠没有明显的影响;半夏泻心汤辛开/苦降法中辛开组药物可以通过激活5-HT4R提高胃肠动力和血清中胃动素水平,苦降组药物可以通过激活TAS2R38提高血清中胃饥饿素水平,阐明了半夏泻心汤辛开苦降法的作用机制。