枳实、枳壳、青皮、陈皮为《中国药典》2020年版收录的芸香科（Rutaceae）橘属（Citrus）亲缘植物药材,具有益气健胃的作用,在临床上均作为理气药使用。目前,四种药材的化学质量差异尚未明确,定量分析–化学计量学–网络药理学整合分析存在不足,以及枳实、枳壳炮制过程化学成分变化规律研究尚不完善。针对这些关键问题,本课题开展了如下研究:1、通过超高效液相色谱–可变波长检测（UPLC-PDA）法,定量分析了枳实、枳壳、青皮、陈皮中9种主要黄酮类成分（芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、枸橘苷、柚皮素、川陈皮素、3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮、桔皮素）,并结合主成分分析和聚类分析方法综合区分四种药材。经系统的方法学验证,构建的方法精密度高、稳定可行,并成功应用于四种药材80批次样品的多成分定量分析研究中。结果显示,9种黄酮类成分的含量在酸橙属（枳实、枳壳）和甜橙属（青皮、陈皮）的样品中存在明显波动,且在未成熟果实（枳实、青皮）中的含量比成熟果实（枳壳、陈皮）中高。基于定量分析数据,采用正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）和聚类分析,成功实现四种药材的区分。进一步通过变量重要性投影（VIP）的值（VIP＞1.0）筛选出四种黄酮类成分:芸香柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮,可作为同时区分四种橘属亲缘植物药材的差异性标志物。2、基于顶空–气质联用（HS-GC-MS）法建立了快速检测枳实、枳壳、青皮、陈皮中挥发性成分的分析方法,并结合主成分分析和聚类分析方法综合区分四种药材。考察了最优称样量,构建的分析方法精密度高、稳定可行,并成功应用于四种药材80批次样品的挥发性成分分析研究中。通过与NIST17.L数据库中色谱峰的保留时间、离子碎片信息进行比对,共鉴定出52个挥发性成分,主要为单萜类及倍半萜类化合物。以52个挥发性成分的峰面积为变量建立OPLS-DA模型,在该统计学模型下枳实、枳壳、青皮、陈皮四种药材区分良好,并通过VIP值（VIP＞1.0）筛选出β-Myrcene、D-柠檬烯、β-Ocimene等26个挥发性差异性标志物。3、以四个黄酮类差异性标志物（芸香柚皮苷、柚皮素、橙皮苷、3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮）为研究对象,构建“成分–靶点–疾病”相关性网络。通过Pub Chem、Swisstarget Prediction数据库查询差异标志物的结构及其相关靶点,采用IPA（Ingenuity pathway analysis）软件进行网络药理学分析,得到相应的经典通路、上游调控因子、疾病、功能网络。分析结果表明,四个化学成分是可能通过对Breast Cancer Regulation by Stathmin1和Colorectal cancer metastasis signaling pathway等多种信号通路的调控,进而参与乳腺癌、结肠炎、结直肠癌等疾病过程。进一步通过IPA内“Path Designer”功能构建“成分–靶点–疾病”相关性网络,该部分研究有助于更好地理解四种橘属亲缘植物药材的化学质量差异。4、基于UPLC-PDA、HS-GC-MS方法,分析不同时间节点的枳实（壳）炮制品中黄酮类成分及挥发性成分的变化规律。结果表明,随着炮制时间的增加黄酮类成分呈现波动变化但基本保持不变;挥发性成分则是随着炮制时间的延长呈现明显下降的趋势,为阐明枳实（壳）炮制品“去燥性而和胃”提供理论依据。本研究以四种芸香科橘属亲缘植物药材（枳实、枳壳、青皮、陈皮）为研究对象,分别用黄酮类成分、挥发性成分成功区分了四种药材;构建了“黄酮类化学成分–靶点–疾病”相关性网络;阐释了枳实（壳）炮制过程中化学成分变化规律。为充分理解四种芸香科橘属亲缘植物药材的化学质量差异提供理论依据,对指导临床合理用药具有重要意义。