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肉鸡肌肉品质的改善和腹部脂肪的过度沉积,是目前肉鸡育种亟待解决的两大难题。C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)是利钠肽(Natriuretic peptide,NPs)家族的重要成员之一,在哺乳动物肌肉发育和脂肪沉积中起着重要的作用,但其具体的分子机制在鸡上鲜有报道。本文以分离提取的鸡腹脂和胸肌组织的前脂肪细胞作为体外试验模型,分别采用CNP激素诱导试验,通过比较分析两种脂肪细胞的增殖、分化和分解能力的变化,从细胞水平深入研究CNP对鸡脂肪代谢调控的分子遗传机制。试验一:CNP调控鸡腹脂脂肪细胞脂代谢的研究。本试验以从腹部脂肪组织分离的前脂肪细胞作为体外研究模型,以10-7mol/L CNP诱导前脂肪细胞,利用MTT、Edu染色和油红O染色方法,观察细胞增殖、分化及分解能力变化;采用Q-PCR方法和试剂盒方法,测定利钠肽家族三个受体(NPRA、NPRB和NPRC)基因的表达变化及cGMP的浓度变化。结果表明:1)CNP诱导后24h和48h,与对照组相比,前脂肪细胞的增殖能力显著增加(P<0.05);2)CNP激素诱导分化脂肪细胞3d和6d,脂肪细胞的分化能力显著低于对照组(P<0.05),而培养基中的甘油浓度显著高于对照组(P<0.05),NPRA mRNA表达无显著变化,而NPRB和NPRC mRNA的表达显著升高(P<0.05),并且脂肪细胞中cGMP含量显著高于对照组(P<0.05),以上结果提示,CNP可能通过激活NPRB/NPRC-cGMP信号通路,进而实现对前脂肪细胞增殖、分化及脂肪细胞分解的调控作用。试验二:CNP调控鸡肌内脂肪细胞脂代谢的研究。本试验以从胸肌组织分离的前脂肪细胞作为体外研究模型,以10-7mol/L CNP诱导前脂肪细胞,利用MTT、Edu染色和油红O染色方法,观察细胞增殖、分化及分解能力变化;采用Q-PCR方法和试剂盒方法,测定利钠肽家族三个受体(NPRA、NPRB和NPRC)基因的表达变化及cGMP的浓度变化。结果表明:1)CNP诱导后24h和48h,与对照组相比,前脂肪细胞的增殖能力显著增加(P<0.05);2)CNP激素诱导分化脂肪细胞3d和6d,脂肪细胞的分化能力显著低于对照组(P<0.05),而培养基中的甘油浓度显著高于对照组(P<0.05),NPRA mRNA表达无显著变化,而NPRB和NPRC mRNA的表达显著升高(P<0.05),并且脂肪细胞中cGMP含量显著高于对照组(P<0.05),以上结果提示,CNP也可能通过激活NPRB/NPRC-cGMP信号通路,进而实现对前脂肪细胞增殖、分化及脂肪细胞分解的调控作用。