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研究背景:肺癌已成为我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,严重威胁群众的健康和生命。肺腺癌（lung adenocarcinoma,LUAD）是肺癌中较常见的病理类型,临床上新确诊肺癌中约40%-50%为肺腺癌。通过对肿瘤发病机制及基因水平的研究来寻找新的分子标志物、治疗靶点是目前肺癌领域的重要研究方向。环状RNA（circular RNA,circRNA）是一类特殊的内源性非编码RNA,具有稳定、保守、组织及时间特异性等特点,且广泛存在于真核生物中,近年来,随着对circRNA的深入研究,研究者们发现环状RNA在多种肿瘤中存在表达异常,其中一些已被发现可以调控癌基因的表达,影响肿瘤细胞的增殖、凋亡及迁移,与肿瘤的发生发展密切相关。研究目的:明确hsacirc0044013在肺腺癌组织中的表达情况,分析其与临床病理资料的相关性;探究hsacirc0044013在肺腺癌患者血浆中的表达水平,检验其作为肺腺癌诊断标志物的可能性;通过细胞实验初探hsacirc0044013对肺腺癌细胞A549的增殖、周期及凋亡的影响。研究方法:第一部分:采用实时荧光相对定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）技术检测肺腺癌组织和癌旁组织中hsacirc0044013的表达水平,并通过患者临床病理资料,进一步分析hsacirc0044013与肺腺癌的相关性。第二部分:采用qRT-PCR技术检测肺腺癌患者及健康志愿者血浆中hsacirc0044013的表达水平,绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）,分析hsacirc0044013作为肺腺癌诊断标志物的特异性和敏感性。第三部分:设计hsacirc0044013的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）使用脂质体Lipo3000将siRNA转染至肺腺癌细胞A549,qRT-PCR确定转染效率及对应siRNA浓度。转染24h后进行细胞实验,分为实验组（siRNA转染组）和对照组（si-NC转染组）,通过CCK-8、EdU检测转染后肺腺癌细胞增殖能力的变化,通过流式细胞仪技术检测转染后细胞周期和细胞凋亡的变化。研究结果:第一部分:通过qRT-PCR检测50对肺腺癌组织及配对癌旁组织石蜡包埋组织标本中hsacirc0044013的表达水平,结果显示hsacirc0044013在肺腺癌组织中的表达水平较癌旁组织显著升高,差异具有统计学意义（P<0.001）。分析hsacirc0044013的表达水平与患者临床病理资料的相关性,结果提示hsacirc0044013的表达水平与肺腺癌组织的肿瘤最大径（P=0.0216）和TNM分期（P=0.0011）呈正相关,与患者的年龄、性别、吸烟史、淋巴结转移情况及肿瘤分化程度无显著统计学差异。第二部分:通过qRT-PCR检测70例肺腺癌患者和70例健康志愿者的血浆中hsacirc0044013的表达水平,结果显示hsacirc0044013在肺腺癌患者血浆中的表达水平高于健康人血浆中的表达水平,差异具有统计学意义（P<0.05）。运用ROC曲线检验hsacirc0044013在肺腺癌诊断中的特异性和敏感性,结果提示hsacirc0044013作为肺腺癌诊断标志物的敏感性为61.43%,特异性为91.43%,AUC=0.75（95%CI:0.6644-0.8352）。第三部分:使用不同siRNA（si-1、si-2）和不同siRNA浓度转染肺腺癌细胞A549,转染后24h通过qRT-PCR检测siRNA转染组和si-NC转染组A549细胞中hsacirc0044013的表达水平,结果提示在si-1转染效率高于si-2,当siRNA浓度为50nM时转染效率最高,可达85%。转染24h后行细胞功能实验,CCK-8实验结果显示hsacirc0044013低表达组和对照组450nm吸光值存在明显差异,差异具有统计学意义（P<0.01）,提示hsacirc0044013下调后,A549细胞增殖减少。进一步行EdU实验验证,结果显示hsacirc0044013表达下调后,EdU染色阳性细胞比例较对照组阳性细胞减少,差异具有统计学意义（P<0.05）,提示hsacirc0044013下调后A549细胞增殖能力减弱。流式细胞技术检测细胞周期提示hsacirc0044013表达下调后,S期、G1/G0期、G2/M期的细胞比例无显著变化,差异不具有统计学意义（P>0.05）,提示hsacirc0044013下调后细胞周期无明显变化。流式细胞技术检测凋亡结果显示相对于对照组细胞,siRNA转染组细胞凋亡百分比无明显变化,提示hsacirc0044013下调后,细胞周期凋亡无明显变化。研究结论:1、Hsacirc0044013在肺腺癌组织中的表达水平较癌旁组织上调,其表达水平与肿瘤大小、TNM分期相关;2、Hsacirc0044013在肺腺癌患者血浆中的表达水平高于健康人血浆中的表达水平,可能成为肺腺癌的诊断标志物;3、Hsacirc0044013下调后,肺腺癌细胞增殖能力减弱,细胞周期、凋亡无明显变化,它可能通过细胞增殖影响肺腺癌发生发展。