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白腐菌是一种专门降解木质素、半纤维素、纤维素等多糖物质的真菌,多数是担子菌,少数是子囊菌。白腐菌对木质素类结构和异生物质的降解依赖其分泌的一些酶,这些酶共同构成了木质素降解酶系。该酶系包括:漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)。该酶系能够转化酚类和非酚类化合物,催化有机物的合成,在绿色化工方面有着广阔的应用前景。为了解白腐菌SQ01锰过氧化物酶对2-羟基-6-氧-6-苯基-2,4-己二烯酸(HOPDA)及其衍生物的作用,揭示锰过氧化物酶新的催化特性,本文在对白腐菌SQ01锰过氧化物酶纯化的基础上,采用锰过氧化物酶对HOPDA/HOPDAs进行转化,利用紫外可见光谱法分析锰过氧化物酶对10种不同取代基的HOPDAs转化情况,并对锰过氧化物酶的稳态动力学参数进行了测定;采用红外光谱法分析HOPDA及其产物的分子结构。结果表明锰过氧化物酶可以转化HOPDA及其卤代HOPDAs,特别是锰过氧化物酶可以催化3,8,11-3Cl HOPDA,而这一物质几乎不能被联苯水解酶和红球菌R04转化。稳态动力学研究表明,在5种HOPDAs中,HOPDA是锰过氧化物酶的最适底物,3,10-2F HOPDA的转化效率(kcat/Km)是最高的。紫外可见光谱分析表明,锰过氧化物酶在转化HOPDA及其衍生物时最大吸收峰在可见光区均会发生蓝移。红外分析表明,锰过氧化物酶可以使HOPDA的共轭双烯转化为单烯,Cβ上的羟基消失。白腐菌SQ01纯化得到的黄色漆酶在610nm处并没有明显的吸收,这与蓝漆酶有着非常明显的差别。典型的蓝色漆酶可以催化多种芳香族化合物生成活性自由基,这些活性自由基能够进行自偶联反应。为了了解黄漆酶催化的偶联反应特性,本文采用黄漆酶对邻苯二酚、间苯二酚和对苯二酚3种酚类物质进行自体聚合与异体聚合反应的研究;通过紫外可见光谱法对三种底物的自体聚合与异体聚合的酶促反应历程进行检测;采用红外光谱法分析产物结构的变化;利用液相色谱-质谱联用仪分析测得产物的分子量范围,最后综合各项测试结果推断出可能的聚合反应机理。实验结果表明:黄漆酶催化酚类底物形成有色大分子聚合物,由于自体聚合与异体聚合在反应过程中都没有检测到醌类中间体的生成;结合红外分析的结果可知邻苯二酚的自体聚合、邻苯二酚与间苯二酚的异体聚合是以C-O-C键连接,其它四种聚合以C-C键连接。漆酶催化二酚类物质的聚合产物分子量范围是1000-2000 Da,产物聚合度在10-18之间。此外,本文还通过高效液相色谱法检测漆酶催化甲苯生成苯甲醛的反应,发现漆酶能够催化该反应,在此基础上采用单因素实验初步优化了漆酶催化甲苯生成苯甲醛的反应,实验结果表明,该酶能够在不依赖任何介体的条件下将甲苯转化为苯甲醛;当反应缓冲液pH在3-9时产率在78.6-93.1%,且反应缓冲液pH为5时产率最高,达93.12%;单因素实验确定了漆酶催化甲苯生成苯甲醛的最适条件:温度30℃,pH 5的醋酸钠-醋酸缓冲液,漆酶添加量1.5 U,底物浓度10 μmol/L,反应时间为1h。