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维生素D3主要用于调节家禽机体钙(Ca)和磷(P)代谢及骨骼发育。首先通过肝脏25-羟化酶羟基化转化为25-羟基维生素D3(25-OH-D3)，再经过肾脏1α-羟化酶羟基化转化成最终活性产物1，25-二羟基维生素D3[1，25-(OH)2-D3]。1，25-(OH)2-D3发挥调节家禽肠道中的P吸收作用时，需要与两种维生素D受体(VDR)结合，分别为细胞核维生素D受体(nVDR)和细胞膜维生素D受体(mVDR)。前者nVDR主要位于肠细胞核内，激活家禽体内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导途径调节机体P吸收。后者mVDR位于肠细胞的基底膜，通过激活蛋白激酶C(PKC)信号传导途径促进P吸收。其中，在家禽小肠无机磷主动转运收过程中Ⅱb型磷转运蛋白(NaPi-Ⅱb)也扮演着重要的角色。研究发现，动物机体磷代谢主要受年龄、饲粮磷水平和维生素D的影响。因此，本试验旨在研究日龄、饲粮磷水平和25-OH-D3对肉鸡肠道磷代谢相关基因表达的影响，为研究肉鸡肠道磷吸收的调节机制奠定基础。 试验一、肉鸡肠道NaPi-Ⅱb和VDR基因在不同日龄阶段的表达规律 本试验旨在研究肉鸡磷代谢相关基因在不同日龄阶段的表达规律，同时，为后续试验选取合适的时间节点。选取144只1日龄健康、体重均匀的罗斯308肉鸡公雏为试验对象，随机分成12个重复，每重复12只。试验期为1～42日龄，分别在7、14、21、28、35和42日龄屠宰肉鸡。结果显示:(1)7～42日龄肉鸡十二指肠nVDR、mVDR、PKCα、NaPi-Ⅱb及肝脏25-羟化酶mRNA表达均呈二次曲线变化，在21日龄左右时达到最高水平(P＜0.05)。 (2)7～42日龄肉鸡肾脏1α-羟化酶mRNA表达量随日龄增大而线性下降(P＜0.05);21日龄肾脏NaPi-Ⅱa mRNA表达水平显著提高(P＜0.05)，21～42日龄维持稳定。 试验二、NaPi-Ⅱb和VDR基因在肉鸡十二指肠、空肠和回肠的表达规律 本试验旨在研究21日龄肉鸡十二指肠、空肠和回肠中nVDR、mVDR、PKCα和NaPi-Ⅱb基因的表达规律。选取72只1日龄健康、体重均匀的罗斯308肉鸡公雏为试验对象，随机分成8个重复，每个重复9只。试验期为1～21日龄。结果显示:(1)21日龄肉鸡小肠段中，十二指肠nVDR和NaPi-Ⅱb mRNA表达量最高，空肠及回肠依次显著降低(P＜0.05)。(2)21日龄肉鸡3段小肠中mVDRmRNA基因表达量回肠最高，但差异不显著(P＞0.05)。 试验三、不同磷水平对肉鸡肠道NaPi-Ⅱb和VDR基因表达的影响 本试验旨在研究饲粮中不同非植酸磷(NPP)水平对21日龄肉鸡小肠NaPi-Ⅱb及VDRmRNA表达的影响。选取300只1日龄健康、体重均匀的罗斯308公雏为试验对象，随机分成5个处理，每个处理6个重复，每重复10只。试验期为1～21日龄。分别饲喂5种饲粮，饲粮NPP水平分别为0.25％、0.35％、0.45％、0.55％和0.65％。结果显示:(1)当饲粮NPP水平由0.25％上升至0.45％时，肉鸡生长性能及骨骼矿化均显著改善(P＜0.05);饲粮NPP水平再次提高至0.65％阶段，未受显著影响(P＞0.05)。(2)肝脏25-羟化酶、肾脏1α-羟化酶及十二指肠VDR mRNA表达与饲粮NPP水平呈二次曲线关系(P＜0.05);当饲粮NPP含量为0.55％时，十二指肠nVDR、mVDR及PKCαmRNA表达水平达到最大值，而肝脏25-羟化酶和肾脏1α-羟化酶mRNA表达量最低。(3)当饲粮NPP水平从0.25％增加到0.65％时，肾脏NaPi-Ⅱa及十二指肠NaPi-Ⅱb mRNA表达水平显著降低(P＜0.05)。 试验四、25-OH-D3对肉鸡肠道NaPi-Ⅱb和VDR基因表达的影响 本试验旨在研究25-OH-D3对14日龄肉鸡小肠NaPi-Ⅱb及VDR mRNA表达的影响。试验选取240只1日龄健康、体重均匀的罗斯308公雏为试验对象，随机分成4个处理，每个处理6个重复，每个重复10只。试验期为1～14日龄。设计4种饲粮，Ⅰ组饲喂基础饲粮（不添加维生素D），Ⅱ组为正对照（基础饲粮中添加1000IU/kg的VD3），Ⅲ、Ⅳ组为试验组（分别在基础饲粮中添加500、1000IU/kg的25-OH-D3）。结果显示:(1)与基础饲粮Ⅰ组相比，试验Ⅲ组添加500IU/kg的25-OH-D3显著提高了肉鸡骨骼矿化指标和肾脏1α-羟化酶和十二指肠mVDR、nVDR及NaPi-Ⅱb mRNA表达水平（P＜0.05）。(2)与试验Ⅲ组相比，添加1000IU/kg25-OH-D3的Ⅳ组肉鸡骨骼重量、肾脏1α-羟化酶和十二指肠nVDRmRNA表达水平均显著降低(P＜0.05)。 综上所述，7～42日龄肉鸡小肠nVDR、mVDR、PKCα和NaPi-Ⅱb基因随年龄提高均呈现先升高后下降的显著变化。21日龄肉鸡小肠段中十二指肠nVDR和NaPi-Ⅱb mRNA表达量最高且差异显著。饲粮NPP水平与21日龄肉鸡肝脏25-羟化酶及十二指肠VDR mRNA呈二次曲线关系;在NPP为0.55％时，肝脏25-羟基化mRNA表达量最低，十二指肠VDRmRNA表达量最高;肾脏NaPi-Ⅱa和十二指肠NaPi-Ⅱb mRNA表达水平随饲粮NPP水平上升显著降低。在饲粮中添加500IU/kg25-OH-D3在转录水平显著上调了肉鸡磷转运相关基因的表达。