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胰源性糖尿病是指由于胰腺外分泌疾病引起内分泌功能不足的一种特殊类型的糖尿病,属于继发性糖尿病。慢性胰腺炎是胰源性糖尿病的主要病因,而胰腺纤维化是慢性胰腺炎的重要病理特征。研究证明,慢性胰腺炎中胰腺组织中Bcl2(B cell lymphoma 2)及Bax (Bcl-2-associated protein)参与细胞凋亡过程,Bax:Bcl2增加提示细胞凋亡增加。促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)及促性腺激素释放激素受体(gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR)的研究发现二者在肿瘤组织中也有直接参与细胞分化增殖的作用。目前认为胰腺GnRH及GnRHR可能通过旁分泌和/或自分泌途径影响胰岛β细胞功能,但二者的具体作用通路尚不清楚。目的观察胰腺纤维化进程中GnRH及GnRHR、Bcl2及Bax mRNA水平表达有无变化,以及胰岛β细胞功能的变化,探讨GnRH、GnRHR与胰岛β细胞功能和Bcl2及Bax变化之间的关系。方法成年雄性SD(Sprague Dawley)大鼠共25只,体重为250-300g,随机分为对照组(A组)、注药1、2、3、6周组(分别记为B、C、D、E组),每组5只。反复腹腔内注射二乙基二硫代氨基甲酸盐(diethyldithiocarbamate, DDC)法制作SD大鼠胰腺纤维化动物模型,注药各组大鼠每周腹腔内注射两次DDC,DDC用生理盐水稀释,用量为500 mg/kg大鼠体重,依分组决定注射周数。对照组大鼠腹腔内注射相同剂量生理盐水。每组大鼠在注药结束后灌胃法行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT),尾静脉取血,同批次测定血糖、血清胰岛素。禁食12小时后,戊巴比妥钠腹腔麻醉处死大鼠,迅速取出胰腺组织,分为两部分待用。一部分用4%福尔马林固定,石蜡包埋,石蜡切片HE染色;部分用于提取组织总RNA,Bio-Rad IQ5 System进行Real Time-PCR(RT-PCR)。PCR产物通过2%琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果1.病病理改改变胰腺组织切片在光镜检查,可见A组胰腺腺泡及胰岛β细胞形态完整,B、C、D组分别可见炎症细胞浸润、腺泡细胞萎缩、空泡变化、小叶间隙增宽,E组可见腺泡细胞呈纤维素样排列。2.胰胰岛β细细细细胞胞胞胞功功功功能能能变变化各组间OGTT试验的血糖无差异(P>0.05),注药各组间OGTT试验各时间点血清胰岛素比较差异有统计学意义(P<0.05);与A组比较,D组空腹血清胰岛素/空腹血糖比值(FINS/FBG)和HOMA-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)升高;C组FINS/FBG下降;C组和E组灌糖30分钟时血清胰岛素/血糖比值(INS/PG (30min))、胰岛素初期反应指数(△IRI/△BS(30 min))和血清胰岛素曲线下面积(INS-AUC)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);D组HOMA-胰岛素敏感性指数(HOMA-S%)下降,P=0.05。3.胰胰腺GnRH、GnRHR、Bcl2、Bax mRNA水水平表表表表达达达变变化各组间胰腺GnRH比较差异有统计学意义,B组、D组分别E组比较,差异有统计学意义,E组表达最高(P<0.05);与A组比较,B组和D组胰腺GnRHR表达降低,D组和E组胰腺Bcl2表达增加,B组和E组胰腺Bax表达增加,注药各组Bcl2:Bax比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.相关性分析胰腺GnRH与空腹血糖呈负相关(r= -0.443);胰腺GnRHR与糖负荷15 min血清胰岛素呈正相关(r=0.435),与Bcl2:Bax呈负相关(r= -0.813), 15min血清胰岛素与Bcl2:Bax呈正相关(r= 0.431)。P值均小于0.05。结论1.胰腺纤维化早期胰岛β细胞功能下降;2.胰腺纤维化进程中,Bcl2:Bax比值上升,提示此时以细胞增殖为主;3.GnRHR与Bcl2:Bax上升呈负相关,提示GnRHR在胰腺纤维化过程中可能参与细胞凋亡;同时胰腺GnRHR与糖负荷15 min血清胰岛素呈正相关,提示GnRHR可能与胰腺纤维化早期β细胞下降有关。