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肿瘤是一种严重危害人类健康的疾病，细胞周期失控是造成肿瘤细胞恶性增殖的主要原因之一。Cyclin D1作为细胞进入增殖周期合成的首个周期蛋白，能够和CDK4/6形成复合物催化下游RB蛋白等底物，进而使下游一系列反应正常进行，在G1/S期转换过程中起到至关重要的作用。而在许多种类的癌症细胞中，Cyclin D1存在过量表达，这导致CDK4/6始终处于激活状态，并最终造成细胞周期失控，使得细胞过度增殖。所以，Cyclin D1是一个潜在的癌症治疗靶点。实验室前期构建了内质网滞留型抗人Cyclin Dl单链抗体，并已经把携带内质网滞留型抗人Cyclin D1胞内scFv基因（ER-ADκ）的质粒，成功的稳定转染进MCF-7细胞中，该基因在肿瘤细胞中得到稳定表达并实现胞内抗体的目标定位。ER-ADκ的稳定表达能够显著抑制肿瘤细胞的生长和增殖，引起细胞周期阻滞，并明显诱导细胞凋亡，但是该胞内抗体抑制肿瘤细胞增殖机制目前并不清楚。由于蛋白质组学在研究癌症标志物、筛选治疗靶标、研究分子机制及了解细胞内信号转导通路等方面有着显著的优势，所以本实验利用蛋白质组学相关技术来分析抗Cyclin Dl胞内抗体的肿瘤细胞增殖抑制的分子机制。本研究首先对癌症细胞双向电泳蛋白制备方法进行了优化，利用SDS提取液抽提与传统TCA/丙酮法相结合，达到了较好的蛋白制备效果，为进行差异蛋白质组学分析奠定了基础；其次利用双向电泳对空质粒MCF-7/plp-Bg细胞系和MCF-7/pBg-ER-ADκ细胞系的差异表达蛋白进行了分析，获得了43个差异蛋白点，利用MALDI-TOF/TOF质谱技术，对ER-ADκ和Bg细胞系29个差异蛋白质点进行了质谱鉴定，且通过数据库检索，有24个蛋白点被成功鉴定，为进一步研究Cyclin D1胞内抗体抑制肿瘤细胞生长的分子机制提供了实验依据。