黄金香柳叶提取物抗氧化和抑菌活性研究

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黄金香柳为桃金娘科白千层属植物,具有鲜亮的黄绿色,为近年培育的有色乔木。该植物具有较高的观赏价值,具有特殊的芳香气味,对环境的耐受性较强。本实验选择海南省五指山地区实验推广种植的黄金香柳为研究对象,系统地研究了黄金香柳叶片乙醇提取物的抗氧化活性,叶片精油的抗氧化和抑菌活性。具体研究内容如下:1、测定黄金香柳叶抗氧化活性,采用单因素优化、中心复合旋转设计的响应曲面法对黄金香柳叶溶剂提取法进行提取优化,选择总多酚含量、总黄酮含量、DPPH自由基清除作用和高价铁离子还原作用为优化目标。结果表明:在单因素优化中,对叶提取物抗氧化活性含量影响最显著的提取条件是乙醇浓度,其次为提取时间和提取温度;通过响应曲面优化显示,提取时间为3.65 d,提取温度为53.26℃,乙醇浓度为34.81%时,提取物的最高总多酚含量为88.6± 1.3 mg GAE/gDW,总黄酮含量为19.4±0.2 mg RE/g DW,高价铁离子还原能力为 2.37±0.01 mM Fe2+/g DW,DPPH 自由基清除能力为86.0±0.3 %。表明黄金香柳抗氧化活性物质含量丰富,可用于天然抗氧化活性物质提取研究,具有较好的应用开发前景。2、采用水蒸气蒸馏法提取黄金香柳叶的精油,选取4种常用有机溶剂石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇进行萃取,得到四种萃取相精油,颜色为淡黄色到深黄色,有特殊的气味,提取率分别为0.882±0.026%、2.645±0.069%、1.354±0.060%和1.233±0.061%,其中乙酸乙酯萃取效率最高。石油醚萃取精油总多酚含量和总黄酮含量最高分别为 6.617±0.535 mg GAE g/SW 和 7.086±0.452 mg RE/g SW;同时,石油醚萃取精油具有最高的抗氧化活性,DPPH和ABTS自由基清除实验的IC50分别为4.180±0.050 mg/mL、5.400±0.140 mg/mL,高价铁离子还原能力为 8.935±0.067 mg RE/g EO,抗氧化活性与精油浓度呈正相关;采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用的分析方法,对精油的成分进行分析鉴定,鉴定出40种化合物,占精油总量的99.2%,主要含有一些酚类、醚类、酯类、醇类、烃类和胺类物质,其中甲基丁香酚含量最高,为65.49%;其次为3,4,5-三甲氧基苯甲酸甲酯(7.92%),草蒿脑(5.93%),芳樟醇(3.46%)等。黄金香柳精油的主要抗氧化活性物质为小极性多酚类物质,且成分含量较单一,开发研究较为方便。3、精油的抑菌活性测定表明,精油对水稻稻瘟菌、火龙果黑斑菌、番茄早疫菌、香蕉盘长孢菌和苜蓿根腐菌5种植物病原菌抑制活性较高,半抑菌浓度(EC50)分别为 33.78±2.35、94.32±5.43、138.25±9.72、85.37±5.01和 205.76±14.70μg//mL,具有一定的抑制活性,对病原菌的酶活测试实验表明,精油对病原菌蛋白质含量、SOD酶和CAT酶都具有一定的抑制活性。其中,对稻梨孢菌的抑制效果最好,与腈菌唑(3.49±0.47μg/mL)相比活性差,但与植物源苦参碱(65.42±2.83μg/mL)相比活性较高。精油主要成分甲基丁香酚在200 μg/mL时,对香蕉盘长孢菌抑制活性最好抑制率为68.04%,与精油相差5.06%;与硫酸链霉素和硫酸庆大霉素相比,精油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和绿脓杆菌具有较好的抑制效果,最小抑菌浓度分别为0.20、0.40、0.45和0.10 mg/mL。说明黄金香柳精油对测试的植物病原菌和食物源致病菌均具有较好的防治活性,具有开发成植物源农药的潜力。
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