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目的：研究成都地区RhD初筛阴性献血者中D变异体的存在情况,重点探索Del型这类极弱D的分子遗传学背景,以及各种变异D献血者可能的筛查策略。方法：2009年6月—2009年11月之间采集74,947份全血中获得318份盐水法初筛阴性标本,采用间接抗球蛋白试验(IAT)筛选部分D和弱D,对IAT阴性的标本采用吸收放散试验,筛查Del型,采用序列特异性引物PCR (sequence-speicific primer-polymerase chain reactions, PCR-SSP)检测各种变异D基因型。吸收放散试验阳性标本采用Del DNA分型试剂盒检测Del等位基因,该试剂盒检测的Del等位基因包括RHD(M285)、RHD(IVS3+1)、RHD(IVS1+1)、RHD (1227A)、RHD(DEL EX9)、RHD(M1I)、RHD(R10W), RHD(L84P)。对无法确定为上述已知Del型的样本进行RHD基因1-7和9-10外显子测定,以便了解其外显子的存在情况。对检测到的弱D15型、RHD (1227A)和RHD (M11)变异D类型进行测序确认,以及疑难标本进行测序分析。结果：318例盐水法初筛阴性标本中检出3例IAT阳性样本,其中2例是弱D15,1例是部分D(RhDVI III).成都地区献血人群中RhDIAT阴性的比例为0.42%。315例IAT阴性标本中ccee表型(56.19%)和Ccee表型(32.06%)比例高。303例IAT阴性标本吸收放散试验,发现71例阳性。通过Del DNA分型试剂盒检测,检出57例(?)RHD(1227A)型、1例RHD(M1I)型、13例无法确定为已知Del型。13例无法确定为已知Del型的样本检测RHD基因1-7和9-10外显子,发现11例样本大部分或全部缺失上述外显子、2例含有全部上述外显子。34例吸收放散实验阴性且含有C或E抗原的标本,经检测RHD基因1-7和9-10外显子及1227A,发现9例RHD(1227A)型、25例部分或全部缺失型。测序确认了弱D15型、RHD (M1I)和RHD (1227A)突变位点,对2例含有所有外显子的标本进行1-10外显子测序未发现突变位点。通过血清学试验和分子生物学试验,我们确定了Del型69例,占IAT筛查RhD阴性的22.77%(69/303)。结论：成都地区常规血清学筛查RhD阴性献血人群中存在多种D变异体。其中Del型最多。检测到的Del型中,DelRHD(1227G>A)等位基因是Del型的主要等位基因类型,并再次证实成都地区Del型与C表型密切相关。目前我们采用的吸收放散试验,Del型的检测准确率偏低,Del型的确认需要血清学方法和多种分子生物学方法相结合。