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随着人们生活水平的提高,高脂膳食已经成为国民健康的危害因素,过多的脂肪沉积诱发了肠道炎症反应引起肠道微环境紊乱、机体氧化损伤和脂代谢异常。论文以松茸蛋白水解物进行灌胃,结合微生物分子生态学技术(ERIC-PCR指纹图谱技术、Real-time PCR技术、Illumina Miseq PE250/PE300测序技术)和代谢组学技术(GC-MS指纹图谱技术),在小鼠长期高脂饮食作用下,评价膳食中的松茸蛋白水解物对机体肠道微生态的影响。本论文主要研究结果如下:(1)松茸干粉中的蛋白含量为14.12%,松茸蛋白水解液水解度为24.54%,含有16种氨基酸,必需氨基酸7种,氨基酸配比均衡且丰富度高,并富含抗氧化活性氨基酸;(2)松茸蛋白水解物能够增加高脂小鼠活跃度,减缓体重增长和小鼠腹部脂肪的积累,与HFD组相比,HFD+T组血清CHO、TG、HDL、LDL和MDA水平分别降低了19.82%、44.09%、19.27%、15.00%、27.09%,SOD、T-AOC和LPL活性分别增加11.51%、14.04%、42.85%,具有差异显著性(P﹤0.05),说明增加了机体抗氧化能力,缓解了高脂饮食造成的血脂异常;(3)ERIC-PCR指纹图谱多态性分析得出,高脂饮食和松茸蛋白水解物均对肠道菌群产生了稳定的影响,均增加了肠道菌群的多样性,高脂饮食对肠道菌群的影响强于松茸蛋白水解物。Real-time PCR对关键菌群分析得出,松茸蛋白水解物增加了高脂饮食下双歧杆菌和拟杆菌属量,降低了大肠杆菌和肠球菌属量,同时,增加了正常饮食下乳酸杆菌和柔嫩梭菌量,说明松茸蛋白水解物对肠道中关键菌群有调节作用;(4)高通量测序检测报告指出,从各组粪便基因得出83222条优化序列,四个组别中共含有9个门类,属级分类水平上检测出66个,种级分类水平上检测出133个,其中Alistipes等8种菌在ND+T组和HFD+T组中比ND组和HFD组都有不同程度的显著增加,Bacteroides等5种菌,除ND组外,HFD组、HFD+T组、ND+T组的量有所增加。松茸蛋白水解物能够改变菌群结构,提高机体产短链脂肪酸菌群的数量,减少条件致病菌的积累,增加了肠道菌群的物种丰度、多样性和均匀度;(5)GC-MS检测条件下共确定了118种物质。其中,7种短链氨基酸类物质、16种长链脂肪酸类物质、19种糖类物质、7种糖酸类物质、7种苯类物质和2种B族维生素,以及很多复杂的其他代谢类产物。图谱分析得出,松茸蛋白水解物明显增加了机体短链脂肪酸、氨基酸和维生素的量;(6)松茸蛋白水解物能够通过改变肠道菌群Bifidobacterium、Blautia、Anaeroplasma、Alistipes和S24-7_norank的量,从而改变机体SOD、T-AOC、D-Galactose、D-Glucose、Hexadecanoic acid和α-Linolenic acid水平,达到增加机体抗氧化能力、促进有益物质积累和加速脂代谢的作用。综上所述,松茸蛋白水解物对于高脂小鼠肠道微生态具有调节作用,能够通过提高肠道菌群多样性、丰度,有益菌量,减少有害菌积累,促进产短链脂肪酸、氨基酸、维生素等特殊菌群的量,从而增加机体抗氧化能力,减弱机体脂代谢异常,达到缓解高脂饮食造成的机体氧化应激损伤。