论文部分内容阅读
背景:紫外线对皮肤晒伤、皮肤炎症、皮肤老化及皮肤癌的发生有重要影响。按波长长短紫外线可分为长波紫外线(UVA,320-400nm)、中波紫外线(UVB,280-320nm)和短波紫外线(UVC,200-280nm)。文献报道紫外线能影响皮肤细胞内多种蛋白质的表达。成纤维细胞是皮肤的重要细胞。本研究课题组在先前的工作中已通过双向凝胶电泳和MALDI-TOF质谱技术发现100mJ/cm~2UVB照射48小时前后人皮肤成纤维细胞中存在33个差异表达的蛋白质点,并鉴定了其中的7种蛋白:表达上调:Vimentin(波形蛋白)、Death receptor-interacting protein(死亡受体反应蛋白RIP)、IL-1 receptor accessory protein(白介素1受体辅助蛋白IL-1 RAcP)、Prohibitin(抑制素)、Prolyl 4-hydroxylase(脯氨酰羟化酶PHD4);表达下降:Annexin A2(膜联蛋白2)、PGK1(磷酸甘油酸激酶)。采用Western-blot及免疫荧光技术检测发现Vimentin和RIP在UVB照射后在细胞内的含量显著上升;prohibitin、IL-1 RAcP、PHD4细胞内含量变化未达统计学差异。目的:采用RT-PCR方法检测在培养人皮肤成纤维细胞中经紫外线照射后AnnexinA2、PGK1的mRNA表达的变化,以寻找紫外线早期损伤标志。方法:用健康男性包皮组织体外培养成纤维细胞,用100mJ/cm~2UVB照射培养人皮肤成纤维细胞,48小时后提取细胞总RNA,RT-PCR后进行紫外荧光显像,以ANX2、PGK1与β-actin的mRNA条带灰度比值用SPSS软件进行半定量分析。结果:UVB照射后成纤维细胞中PGK1 mRNA表达下调,且具有显著性差异(p<0.05)。结论:PGK1 mRNA很有可能是紫外线早期损伤的标志。