【摘 要】
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目的:研究Shh信号通路中Smo抑制剂联合地西他滨对骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞株增殖、凋亡、细胞周期的影响,并探讨可能的分子机制。方法:体外培养MUTZ-1细胞株,CCK-8法检测细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期变化,q RT-PCR法检测细胞Smo和Gli-1 m RNA的表达,Western blot法检测细胞Smo、Glil、PI3
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目的:研究Shh信号通路中Smo抑制剂联合地西他滨对骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞株增殖、凋亡、细胞周期的影响,并探讨可能的分子机制。方法:体外培养MUTZ-1细胞株,CCK-8法检测细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期变化,q RT-PCR法检测细胞Smo和Gli-1 m RNA的表达,Western blot法检测细胞Smo、Glil、PI3K、p-AKT、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin Dl蛋白的表达。结果:Smo抑制剂Jervine或地西他滨单药均可抑制MUTZ-1细胞的增殖,并且呈时间依赖性和浓度依赖性。两药联合干预后能够更明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,使G1期细胞占比增多,S期细胞占比减少,表明Jervine可使MUTZ-1细胞周期阻滞于G1/S期。q RT-PCR检测结果显示两药联合干预后MUTZ-1细胞中Smo、G1i-1 m RNA的表达显著降低,Western blot法检测结果显示两药联合干预后MUTZ-1细胞中Smo、G1i-1、PI3K、p-AKT、Bcl-2和Cyclin Dl蛋白的表达水平显著下调,Caspase-3蛋白的表达则相反。结论:Smo抑制剂联合地西他滨对MUTZ-1细胞的增殖及凋亡具有协同作用,其机制可能是通过干扰Shh信号通路调控PI3K/AKT信号轴从而介导下游蛋白表达改变来实现。
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