解淀粉芽孢杆菌HM618生物转化厨余合成表面活性素

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表面活性素具有抗菌、抗病毒、抗支原体等生理活性以及优越的表面活性,在生物医药、食品化妆品行业、石油开采等领域具有广泛的应用前景。针对表面活性素的原料成本高、产量低的难题,选用厨余为底物经解淀粉芽孢杆菌HM618生物转化合成表面活性素。通过两种策略来预处理厨余:(1)通过外源添加商品酶降解厨余;(2)构建人工混菌体系,探讨解淀粉芽孢杆菌生物转化厨余合成表面活性素的可行性。主要研究结果如下:(1)通过单因素法优化单酶的酶解条件(p H、酶的添加量、温度),结果表明:淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖淀粉糖苷酶的酶解p H在近中性范围有利于表面活性素的合成;纤维素酶、脂肪酶的最佳酶解p H分别为5.0、8.0。复合酶预处理厨余时,p H设定为7.5;淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶、葡萄糖淀粉糖苷酶的最佳酶添加量分别为400 U.g-1、4 U.g-1、160 U.g-1、720 U.g-1、200 U.g-1;淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶预处理组均在50℃下获得最大的表面活性素产量,脂肪酶最佳酶解温度为30℃。(2)采用单酶对厨余进行预处理时,经脂肪酶预处理组,表面活性素的产量最大,为62.905 mg.gds-1。在优化后的酶解条件下,复合酶对厨余进行预处理,结果表明复合酶预处理组的表面活性素产量高于任何单一酶预处理组,产量为75.707 mg.gds-1。(3)在3种不同混菌体系中:HM 618与产脂肪酶真菌构巢曲霉共培养时,表面活性素的产量最高,为65.404 mg.gds-1。产量最低的是米曲霉与HM 618混合培养,为42.598 mg.gds-1。构巢曲霉与HM 618共培养时表面活性素的产量高于单独脂肪酶预处理组,这说明产酶真菌代替商品酶的可行性。(4)牛津杯法测定HM 618以厨余为底物合成的表面活性素对立枯丝核菌、灰葡萄孢有一定的抑菌效果。经LC-MS鉴定表面活性素含有三种不同脂肪链长度的同系物,分别为:C13表面活性素、C14表面活性素、C15表面活性素。除表面活性素外,还检测到伊枯草菌素,但未检测到丰原素。上述研究表明厨余经两种不同预处理方式处理后发酵均可产生表面活性素,为降低其生产成本提供了可行的策略,为工业放大生产提供了工艺技术参数支持。
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