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1研究目的以“脾主统血”理论为指导,通过系统的文献整理,分析和阐述“脾主统血”理论内涵并加以拓展和丰富,研究其在出血性疾病中的应用;通过注射豚鼠抗小鼠血小板血清（GP-APS）主动免疫法模拟免疫性血小板减少症发病过程,以健脾益气摄血方为干预药物,观察治疗效果,并探讨免疫网络调控机制。2研究方法2.1文献理论研究通过联机检索与手工分检两种方式,收集“脾主统血”、“中医药治疗ITP”古今文献,加以系统整理与分析,探讨“脾主统血”理论内涵、拓展与临床应用,明确“脾主统血”理论在临床实践中的指导价值。2.2基础实验研究实验方法如下:①制备豚鼠抗小鼠血小板血清（GP-APS）,并进行效价检测。②取BALB/c小鼠10只,雌雄各半,根据血小板计数随机分为1:2组和1:4组,按照100μL/20g体重腹腔注射GP-APS,于注射前、注射后6h、12h和48h分别从尾静脉割尾取血,判定造模情况。③造模成功后,从80只小鼠尾静脉取血,按照血小板计数随机分为正常对照组、模型对照组、强的松组、健脾益气组,造模第8天开始各组均按0.1ml/10g体积药物灌胃干预,每天1次共8天。④造模过程中动态观察小鼠一般行为状态、外周血血象,处死小鼠后检测免疫器官指数及形态学改变,评价健脾益气摄血方治疗效果。⑤造模及分组药物干预后,摘眼球取全血,不抗凝,制备待测血清,取相应组织器官,制备检查标本,以ELISA法、免疫组织化学法检测血清、肠组织、脑组织中转化生长因子β1、γ干扰素、白介素4、免疫球蛋白A、β内啡肽、5羟色胺、血管活性肠肽、去甲肾上腺素,探讨健脾益气摄血方调控ITP模型小鼠免疫网络机制。3 研究结果3.1文献理论研究基于传统中医理论,首次提出了“脾主统血”藏象理论内涵不仅仅是脾脏对血液统摄作用的狭义概念,还应当涵盖“生血”、“行血”、“裹血”、“止血”四种生理与病理变化过程的广义概念,其对指导临床实践具有重要意义。3.2治疗效果评价通过健脾益气摄血方干预ITP模型小鼠,实验结果如下:造模后各造模组小鼠血小板计数、游泳时间低于正常组,差异有统计学意义（p<0.05）,白细胞计数高于正常组,差异有统计学意义（p<0.05）。实验结束时,游泳时间、体温、体重、进食量各组比较,组间差异无统计学意义（p>0.05）。健脾益气组、强的松组血小板计数高于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）;血红蛋白含量、白细胞计数、血小板分布宽度各组间比较,差异无统计学意义（p>0.05）。模型对照组、健脾益气组胸腺指数高于正常对照组,差异有统计学意义（p<0.05）;强的松组与正常对照组比较,差异无统计学意义（p>0.05）;模型对照组、强的松组、健脾益气组脾脏指数高于正常对照组,差异有统计学意义（p<0.05）,强的松组低于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）。研究结果证明,健脾益气摄血方、强的松均有提升ITP模型小鼠外周血小板计数作用且效果相似,健脾益气摄血方对ITP小鼠免疫器官有一定的调节作用。3.3免疫网络调控效应我们在观察了一组免疫性血小板减少症基础研究的常用的一般免疫指标的基础上,选择了部分与机体免疫反应或免疫过程有一定的关联性的神经递质或血管活性物质为免疫网络效应的研究指标,以研究健脾益气摄血方的免疫网络调控效应。3.3.1一般免疫指标检测:①转化生长因子β1（TGF-β1）检测:实验各组小鼠血清TGF-β1含量组间比较,无统计学意义（p>0.05）。②γ干扰素（IFN-γ）与白介素4（IL-4）检测:与正常对照组比较,模型对照组、强的松组IFN-γ含量升高,而健脾益气组较正常对照组、模型对照组降低,差异有统计学意义（p<0.05）;模型对照组、健脾益气组IL-4含量低于正常对照组,强的松组IL-4含量高于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）;模型对照组IFN-γ/IL-4比值高于正常对照组,强的松组、健脾益气组低于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）,但与正常对照组比较,差异无统计学意义（p>0.05）。③免疫球蛋白A（IgA）检测:模型对照组、健脾益气组血清中IgA含量高于正常对照组,而强的松组含量低于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）;与正常对照组比较,模型对照组、强的松组小鼠肠道IgA含量降低,与模型对照组比较,健脾益气摄血组IgA含量高,差异有统计学意义（p<0.05）。3.3.2模型小鼠血清免疫网络指标检测:①β-内啡肽（β-EP）检测:与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清β-EP含量升高;与模型对照组比较,健脾益气组含量降低,差异有统计学意义（p<0.05）。②5-羟色胺（5-HT）检测:与正常对照组对照,模型对照组5-HT含量降低,差异有统计学意义（p<0.05）;与模型对照组比较,强的松组、健脾益气组含量上升,其中强的松组与模型对照组差异有显著统计学意义（p<0.01）,健脾益气组与模型对照组差异有统计学意义（p<0.05）。③血管活性肠肽（VIP）检测:与正常对照组比较,模型对照组VIP含量降低;与模型对照组比较,强的松组、健脾益气组VIP含量有明显回升,差异有统计学意义（p<0.05）。④去甲肾上腺素（NE）检测:与正常对照组比较,模型对照组、强的松组、健脾益气组小鼠血清NE含量升高,差异有统计学意义（p<0.05）。3.3.3模型小鼠肠组织免疫网络指标检测:①β-EP检测:模型对照组小鼠肠道β-EP含量低于正常对照组,健脾益气组小鼠肠道β-EP含量高于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）。②5-HT检测:模型对照组小鼠肠道5-HT含量低于正常对照组,健脾益气组5-HT含量高于正常对照组,差异有统计学意义（p<0.05）;与模型对照组比较,强的松组、健脾益气组含量明显升高,差异有统计学意义（p<0.05）。③VIP检测:模型对照组小鼠肠道VIP低于正常对照组,健脾益气组VIP含量高于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）。④NE检测:健脾益气组小鼠肠道NE含量高于模型对照组,差异有统计学意义（p<0.05）。3.3.4模型小鼠脑组织免疫网络指标检测:①β-EP检测:经统计学处理,各组间含量比较差异无统计学意义（p>0.05）。②5-HT检测:经统计学处理,各组间含量比较差异无统计学意义（p>0.05）。③VIP检测:与模型对照组比较,健脾益气组含量降低,差异有统计学意义（p<0.05）。④NE检测:强的松组含量较模型对照组升高,差异有统计学意义（p<0.05）;其余各组间含量比较差异无统计学意义（p>0.05）。4 结论与创新文献理论研究结论与创新:①通过文献研究,丰富了脾藏象中“脾主统血”理论内涵,首次提出了“脾主统血”的广义概念,认为“脾主统血”是对“脾”与“血”关系的综合概念,即包括“生血”、“行血”、“裹血”和“止血”的丰富内涵。②基于“脾主统血理论”,通过中医药治疗免疫性血小板减少症文献分析,确立“健脾益气摄血”治则是免疫性血小板减少症主要治疗原则之一。效应机制研究结论与创新:①在“脾主统血”理论指导下的基础实验证明,健脾益气摄血方能有效提升ITP模型小鼠外周血小板计数,提升效果与强的松类似。②检测了ITP模型小鼠TGF-β1、IFN-γ、IL-4与IgA作为整体免疫指标,证实了健脾益气摄血方对ITP模型小鼠的整体免疫状态具有调控效应,肠道免疫也发挥了一定的作用。③首次在研究中医药治疗ITP的效应机制中,选择了与机体免疫反应或免疫过程有一定的关联性的神经递质或血管活性物质为检测指标,并证实健脾益气摄血方对β-EP、5-HT、VIP、NE含量有调控效应,体现了健脾益气摄血方的免疫网络调控效应。