靶向脂质体作为抗肿瘤药物的载体已获得广泛的关注。其中,叶酸作为叶酸受体的靶向配体,能够使载药脂质体有选择性地进入叶酸受体高表达的肿瘤细胞。阳离子抗菌肽由于其独特的作用机制和显著的肿瘤细胞选择性,成为当前抗肿瘤药物研究的热点。抗菌肽L-K6含有13个氨基酸残基,7个净正电荷,呈α-螺旋二级结构,能够选择性抑制多种恶性肿瘤细胞的增殖。由于抗菌肽体内易水解,稳定性较差等原因,限制了其进一步的应用。因此,本论文旨在建立叶酸受体靶向L-K6抗菌肽脂质体(FA-L-K6-LIP)载药体系,并对其理化性质、稳定性、体内外抗癌活性及靶向性进行评价。本文首先采用前插法和后插法制备FA-L-K6-LIP,比较其药物包封率,确定最佳制备方案为后插法,并对FA-L-K6-LIP进行表征。实验结果显示,FA-L-K6-LIP包封率为(48.11±1.29)%,粒径为(98.48±0.23)nm,Zeta电势为(-9.05±0.17)m V,透射电子显微镜(TEM)观察基本呈圆球形状。其次,我们利用HPLC(高效液相色谱)分析了不同时间点(FA-L-K6-LIP)中的L-K6含量(默认0h时间点药物含量为100%),结果显示,24h时L-K6含量为85%,48h脂质体中L-K6含量仍在75%左右,显示出较好的稳定性。FA-L-K6-LIP在体外与血清等体积共孵育12h、24h和36h后粒径均在100nm左右,显示出良好的稳定性,为体内实验奠定了基础。最后,我们对FA-L-K6-LIP的体内外抗乳腺癌活性及靶向性进行了初步评价。MTT实验和荧光酶标仪检测结果显示,FA-L-K6-LIP在体外作用24h后,能够被人乳腺癌MCF-7细胞有效地摄取,与L-K6抗菌肽具有相近的抑癌活性。在MCF-7细胞建立的裸鼠肿瘤模型中,近红外荧光(NIRF)小动物成像结果显示,和其他组织器官相比,FA-L-K6-LIP在肿瘤区域的荧光强度最强,且FA-L-K6-LIP组的靶向性强于L-K6-LIP组。体内抑瘤实验中,FA-L-K6-LIP组比空白组更能有效抑制肿瘤组织增殖,且对小鼠生存状态和体重均未见明显影响。综上所述,我们构建的FA-L-K6-LIP稳定性良好,在体外对人乳腺癌MCF-7细胞表现出较强的抑癌效果,并且在体内能够主动靶向于肿瘤部位,抑制肿瘤组织增殖。这为今后肽类抗癌药物制剂的研究和临床应用提供了重要的参考价值。