【摘 要】
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目的:该实验通过基因工程重组技术,合成单链抗体融合基因,通过噬菌体显示系统,与表达载体pCANTAB5E重组,在E.coliTG1中表达,经过三轮筛选,挑选出重组阳性克隆,并测序,分析其
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目的:该实验通过基因工程重组技术,合成单链抗体融合基因,通过噬菌体显示系统,与表达载体pCANTAB5E重组,在E.coliTG1中表达,经过三轮筛选,挑选出重组阳性克隆,并测序,分析其结构,找出CDR(抗原互补性决定区)的核苷酸组成,为大量获取可溶性单链抗体以及人源化抗体的合成打下基础.同时,探讨在抗原性质不明的情况下,细胞筛选的可行性.结论:一、制备抗人乳腺癌单链抗体(ScFv)的表达系统获得成功,为下一步大量获取可溶性单链抗体作好了准备.二、采用细胞筛选替代传统的纯化抗原筛选获得成功.三、从测序结果中可以分析出,DNA序列及推导出的氨基酸序列符合免疫球蛋白的结构要求,CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸组成亦已明确,可进一步作为人源化抗体合成中CDR区的组成元件.
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