六株高效拮抗溶磷真菌对喀斯特植物诸葛菜的促生与抗逆性影响

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溶磷真菌(phosphate-solubilizing fungi,PSF)是土壤环境中广泛存在的一类重要的功能真菌类群,因其独特的溶磷能力和遗传稳定性,在绿色农业生产实践与生态环境修复等方面都有着重要的应用价值,成为当前重要的微生物资源。在以贵州地区为代表的西南喀斯特石漠化地区,水土流失严重,岩石裸露,植物覆盖率低,土壤中的磷元素因与其他矿物质紧密结合难以溶解,导致磷元素成为石漠化植物恢复过程中限制植物生长的营养元素之一。研究表明,溶磷真菌使贫磷土壤中的有效磷含量显著增加,为植物的生长发育提供良好的生存环境。而且溶磷真菌对于提高植物应对干旱、盐碱等胁迫也具有重要作用,但目前能够满足绿色农业生产实践与生态环境修复的高效溶磷功能真菌资源还十分有限。本论文通过采集植物根际土样,以稀释平板法分离出一批具有溶磷能力的真菌资源;以平板对峙培养结合菌株发酵液法,评价溶磷真菌对作物重要病害病原菌油茶炭疽菌(Colletotrichum camelliae)、葡萄灰霉(Botrytis cinerea)、大豆核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的潜在生物防治能力;通过黄瓜苗试管培养方法与诸葛菜(Orychophragmus violaceus)盆栽实验,快速筛选和评价溶磷真菌对植物的促生能力;以15%PEG-6000和300mmo L/L盐碱溶液模拟干旱与盐碱胁迫,评价菌株对提高诸葛菜抗干旱与盐碱方面产生的影响;对筛选出的6株高效溶磷真菌,以菌株形态学特征结合ITS与RPB2基因构建分子系统发育树,鉴定菌株的分类地位。本研究从贵州、广东、广西和安徽等地区采集的29份土样中,共分离到88株具有溶磷能力的真菌资源菌株,其中有17株溶磷真菌不仅对上述四种病原菌有着较强的拮抗作用,而且也表现出很强的促生作用。其中AHBB-HS134、GYAHH-CCT186、GYAHH-CCT188、AHBB-CT195、AHBB-CT196和GDDG-JC710等6株溶磷真菌对喀斯特适生植物诸葛菜有显著的促生作用。AHBB-CT195与AHBB-CT196的促生效果最好,分别达到166.72%和207.32%(总干重),而且还能够显著提高诸葛菜对盐碱与干旱环境胁迫的耐受能力。通过构建分子系统发育树,分别鉴定了溶磷真菌6株代表性菌株分类地位,AHBB-HS134属于篮状菌属(Talaromyces)真菌,GYAHH-CCT186、GYAHH-CCT188、AHBB-CT195和GDDG-JC710属于青霉属(Penicillium)真菌,AHBB-CT196属于曲霉属(Aspergillus)真菌,其中GDDG-JC710为青霉属的一个新种,命名为东莞青霉(Penicillium dongguanensis G.Tao,Y.Meng&D.Q.Huang),并进行了物种描述。通过本研究分离出一批强溶磷能力的真菌资源,其中部分筛选出17株具促生与生防作用等绿色农业实践和生态作用的高效功能菌株,为进一步研发高效溶磷真菌菌剂和新型微生物肥料与其在绿色农业生产和喀斯特石漠化生态环境的修复中的应用提供重要的真菌资源。
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