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背景：美国的学者在20世纪80年代提出了“组织工程”的概念,组织工程是一门交叉学科,包括了生命科学、材料学等学科知识。组织工程研究主要包括：种子细胞、支架材料、细胞外基质。其中,支架材料是该领域近年来研究的热点。本实验通过冷冻干燥法制备壳聚糖/藻酸盐复合支架材料,并采用新型天然交联剂京尼平对材料进行交联,探究京尼平、紫外线两种交联方法对支架材料制备的影响。目的：1.比较京尼平和紫外线交联后的壳聚糖/藻酸盐复合支架材料的降解率、孔隙率、含水量、细胞毒性以及生物力学等特性；2.探究交联温度对京尼平交联壳聚糖/藻酸盐组织工程支架的影响。方法：取1只成年健康Wistar大鼠骨髓,分离、培养BMSCs.采用冷冻干燥法制备壳聚糖/藻酸盐复合支架。1.①按照交联方法不同分为：京尼平组、紫外线组。②扫描电镜下观察材料的表面结构以及检测材料的降解率、孔隙率、含水量、细胞毒性以及生物力学。2.运用冷冻干燥法制备壳聚糖/藻酸盐支架材料,分别在4℃、25℃、37℃条件,于0.5%京尼平溶液中交联24h,作为实验组。以未用京尼平交联的支架材料作为对照组,评价支架材料降解率、细胞毒性、孔隙率、含水量以及生物力学性能的特点。结果：1.①紫外线组与京尼平组均表现为多孔隙结构,无明显差异。②紫外线组降解率高于京尼平组。③京尼平组与紫外线组的孔隙率差异无统计学意义,含水量差异比较有统计学意义。④两组均表现为较低的细胞毒性,良好的生物相容性。⑤京尼平交联组的生物力学特性较紫外线组显著提高。2.①伴随交联温度升高,支架材料的颜色从浅紫色变为紫黑色,未交联的支架材料为白色；②降解率4周后在4℃组为21.54%±3.07%、25℃组为9.9%±1.2%、37℃组为8.98%±0.79%。其中,37℃和25℃组抗降解能力优于4℃组(P<0.05)。各实验组均优于对照组(P<0.01)。③弹性模量在4℃组为0.84±0.55,25℃组为1.44±0.06,37℃组为1.53±0.02,对照组为0.79±0.16。对照组与25℃组与37℃组之间差异计较有统计学意义(P<0.05)。④孔隙率、含水量、细胞毒性各实验组间未见明显差异。结论：1.京尼平交联的壳聚糖／藻酸盐复合支架材料,具有良好的生物学特性,为组织工程脊髓领域提供了非常具有潜力的材料。2.随着交联温度的提高,支架材料的抗降解能力、抗拉伸性能增加,且对支架材料的结构、细胞毒性、孔隙率以及含水量无明显影响。