论文部分内容阅读
目的:本文旨在研究神经干细胞(neural stem cells,NSCs)在分化过程的不同时期细胞的表面增强拉曼效应(surface-enhanced Raman scattering,SERS)光谱,比较它们的区别,从光谱学这一新的手段来鉴定NSCs,并以物理学能级结构的改变研究干细胞分化前后的变化,给临床NSCs移植提供一定实验参考依据。
方法:将体外培养的NSCs经过传代纯化后诱导其分化为神经细胞(neuralcells,NCs),分别取分化前的NSCs、分化3天、分化6天和分化10天的细胞固定于SERS活性基底银/硅纳米孔柱阵列(Ag/Si-NPA)上,应用激光共焦显微拉曼光谱仪测定分化前后细胞SERS光谱。
结果:
(1)400~1800cm-1范围内拉曼峰强度可区别出NSCs和NCs,1530cm-1处拉曼峰的存在可鉴定出NSCs,1555cm-1处的拉曼峰值情况还可判断NSCs的分化进程。
(2)2800~3000cm-1范围内,分化10天细胞的拉曼峰强度最高,其次是分化6天的细胞、NSCs,分化3天细胞的拉曼峰强度最低。分化3天以内,细胞中脂类物质的含量剧减,但3天后随着分化时间增加,细胞内脂类物质含量逐渐升高。
(3)NSCs和分化过程细胞中脂类物质的构像有所不同,且都是CH3对称伸缩振动模式占比例较大,其次是CH2反对称伸缩振动和CH3反对称伸缩振动,CH2对称伸缩振动模式占比例最小。
结论:SERS光谱可以成为NSCs和神经细胞的鉴定手段,也可作为NSCs分化成NCs进度和分化机理的研究方法,能为临床NSCs移植治疗神经系统退行性疾病提供一定的实验依据,是一种新的干细胞研究方法。