目的:1.以人白血病细胞系K562细胞为研究对象,观察质子泵抑制剂奥美拉唑促进K562细胞凋亡的作用,并初步探讨其作用机制;2;观察奥美拉唑增强白血病化疗药物多柔比星对K562细胞的毒性作用,并初步探讨其作用机制;3.以人白血病细胞系耐药株K562/A02细胞为研究对象,观察奥美拉唑逆转K562/A02细胞耐药作用,并初步探讨其作用机制。方法:1.第一章实验:（1）采用四唑蓝（MTT）比色法观察奥美拉唑对K562细胞的毒性作用,计算奥美拉唑对K562细胞IC₅₀、IC₂₀值,并选取小于IC₂₀药物剂量进行相关实验;（2）台盼兰试验测定在不同PH环境下奥美拉唑对K562细胞生长影响;（3）采用PH计检测50μg/ml奥美拉唑处理K562细胞24h后细胞外PH值（PHe）;（4）用Annexin V法检测不同浓度奥美拉唑处理后细胞凋亡变化。2.第二章实验:（1）一定浓度的奥美拉唑预处理K562细胞0h、24h,MTT法观察多柔比星对K562细胞的毒性作用,计算多柔比星对K562细胞的IC₅₀值;（2）奥美拉唑5.0μg/ml预处理K562细胞24h后,流式细胞术检测多柔比星摄入6h及多柔比星排出第18h、24h、40h时细胞内的多柔比星浓度。3.第三章实验:（1）台盼兰试验测定奥美拉唑对K562/A02细胞生长影响,选择终浓度分别为5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml对细胞生长无影响的奥美拉唑药物剂量进行后续实验;（2）5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml奥美拉唑预处理K562/A02细胞24h,MTT法观察多柔比星对K562/A02细胞的毒性作用,计算多柔比星对K562/A02细胞的IC₅₀值;（3）5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml奥美拉唑处理K562/A02细胞24h后,采用流式细胞仪检测细胞P-gp的表达;（4）胞内罗丹明123潴留实验检测P-gp功能状态。结果:1.奥美拉唑对K562细胞的IC₅₀值为127.031μg/ml,IC₂₀为59.315μg/ml,我们选取无细胞毒性作用的50μg/ml奥美拉唑进行后续有关实验;2.在PH分别为7.0、6.5、6.0、5.5、5.0的细胞培养液中培养K562细胞24h后进行台盼兰试验几乎未见蓝染细胞;而奥美拉唑处理的细胞组均出现蓝染细胞（死亡细胞）,且随着PH值的降低蓝染细胞增多;3.细胞外PH测定:无任何处理的K562细胞的PHe=7.133±0.057（n=3）,而奥美拉唑预处理的K562细胞的PHe=7.300±0.100（n=3）,结果显示奥美拉唑预处理后细胞PHe增加,两组结果比较有差异（P＜0.05）;4.奥美拉唑处理后细胞凋亡情况:奥美拉唑（终浓度分别为180、240、300、400μg/ml）处理K562细胞24h凋亡百分比依次为18.960±0.282%、49.367±1.233%、75.510±0.958%、90.657±0.398%;与空白对照值（0.757±0.006%）比较凋亡百分比明显增加（P＜0.05）。48h凋亡百分比依次为28.073±0.445%、60.773±0.545%、83.257±0.635%、93.997±0.095%;与空白对照值（0.757±0.006%）比较凋亡百分比明显增加（P＜0.05）,且与同等剂量24h的凋亡百分比比较也有差异（P＜0.05）;5.加入Caspase家族抑制剂与奥美拉唑（终浓度分别为180、240、300、400μg/ml）共处理K562细胞凋亡百分比依次为18.843±0.075%、48.233±0.150%、74.073±0.825%、90.777±0.188%;与未加Caspase家族抑制剂的同等剂量奥美拉唑处理24h后的凋亡百分比（见结果4）比较无明显差异（P＜0.05）;6.奥美拉唑（终浓度为1.0、2.0、5.0、10.0μg/ml）预处理0h,多柔比星对K562细胞的IC₅₀值依次为0.797±0.006μg/ml、0.800±0.026μg/ml、0.813±0.060μg/ml、0.740±0.010μg/ml,与多柔比星单独作用K562细胞时的IC₅₀值（0.772±0.026μg/ml）比较,结果无明显变化（P＞0.05）;奥美拉唑（终浓度为2.0、5.0、10.Oμg/ml）预处理24h,多柔比星对K562细胞的IC₅₀值（0.772±0.026μg/ml）明显降低（P＜0.01）;7.奥美拉唑5.0μg/ml预处理24h,细胞内多柔比星摄入量有明显增加:由未处理时的多柔比星荧光强度48.973±1.643增加到55.043±3.117（P＜0.05）;且第18h、24h、40h时排出量（多柔比星荧光强度）依次为14.573±1.493、24.050±3.689、26.180±3.475,而未处理时的各时间段排出量（多柔比星荧光强度）依次为25.323±0.840、32.367±3.147、34.977±2.418,各时间段之间相互比较明显降低（P＜0.05）;8.奥美拉唑（终浓度分别为5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml）培养K562/A02细胞48h,台盼兰试验几乎未见蓝染细胞,对细胞生长无影响;9.奥美拉唑（终浓度分别为5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml）预处理K562/A02细胞24h后,多柔比星对K562/A02细胞的IC₅₀值依次为5.665±0.007μg/ml、4.742±0.016μg/ml、2.889±0.010μg/ml、0.856±0.007μg/ml,分别与对照组IC₅₀值（8.704±0.036μg/ml）比较明显降低（P＜0.05）;10.奥美拉唑（终浓度分别为5.0、10.0、20.0、40.0μg/ml）预处理K562/A02细胞24h后,流式细胞仪检测P-gp的荧光强度依次为89.237±0.610、77.437±0.539、63.730±1.09.6、48.393±0.413,与对照组P-gp的荧光强度（101.163±0.847）比较明显降低（P＜0.05）,且随着奥美拉唑浓度的增加P-gp表达抑制越强;11.相对应的:不同浓度奥美拉唑预处理后细胞内Rho123荧光强度依次为8.553±0.055、12.740±0.060、20.640±0.181、26.607±0.368,与对照组细胞内Rho123荧光强度（3.063±0.032）比较明显增加（P＜0.05）,同样随着奥美拉唑浓度的增加P-gp功能减弱越明显。结论:1.一定浓度的奥美拉唑能够促进K562细胞凋亡,且随着奥美拉唑浓度的增加K562细胞凋亡率增高,而且随着奥美拉唑作用时间的延长K562细胞的凋亡率也增高;提示奥美拉唑促进K562细胞凋亡呈剂量时间依赖性;2.奥美拉唑促K562细胞凋亡是非Caspases途径,可能存在着其他的作用机制诱导凋亡;3.奥美拉唑处理后K562细胞外的PH值（PHe）增高,提示奥美拉唑处理后逆转了细胞的异常酸环境,为抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡创造了有利条件;4.一定浓度的奥美拉唑预处理K562细胞能够明显增强多柔比星对白血病细胞的毒性作用,且随着奥美拉唑浓度的增加对增强多柔比星杀伤K562的作用越明显;进一步研究表明奥美拉唑预处理不仅增加化疗药物进入细胞内,而且强烈抑制了药物经分泌旁路排出细胞外;5.奥美拉唑预处理耐药株K562/A02细胞,可以使K562/A02细胞P-gp表达减少,且P-gp的药物外排功能降低,增强耐药株对化疗药物的敏感性,逆转细胞耐药性;且随着奥美拉唑浓度的增大,其逆转耐药性能力增强。