研究低强度脉冲超声对阿糖胞苷处理后兔骨髄来源血细胞的影响

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背景:恶性肿瘤是目前危害人类生命与健康的最常见、最严重的疾病之一。恶性肿瘤的治疗方法中,化疗一直占有重要的地位。然而在治疗过程中,化疗药物不仅能够杀伤肿瘤细胞,并且对机体的其他正常组织细胞也有很大的伤害,造成不同程度的毒副作用。在诸多毒副作用中,化疗药物产生的骨髓抑制尤为严重,以骨髓造血干细胞损伤最为明显,可导致骨髓来源的外周血血细胞数量下降,以白细胞、血小板减少最为严重。而血细胞数量下降所导致的贫血、致死性感染及出血,对化疗进程及患者生存预后有着消极的影响。目前,对于肿瘤化疗所导致的骨髓抑制主要表现在白细胞、血小板等血细胞的减少,而其治疗多采用对症疗法,主要依赖升白细胞药物、血小板输注及相关因子治疗来改善患者情况,然而这些治疗方法对于部分患者有副作用甚至无效,且费用昂贵。所以,需要找到相比现有疗法更便宜、副作用更小的治疗方法来改善这些化疗后的不良反应,从而提高肿瘤化疗的安全性。低强度脉冲超声(Low Intensity Pulsed Ultrasound, LIPUS)作为近年来较为热门的一种安全有效的物理治疗方法,大量出现在动物及临床试验中。近年大量研究发现LIPUS可促进间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)、成纤维细胞等多种细胞的增殖。本课题组前期研究已初步证实LIPUS辐照可促进正常骨髓有核细胞增殖,而白细胞的数量变化与骨髓有核细胞的增殖密切相关。因此,本课题使用阿糖胞苷处理新西兰兔作为研究对象,采用LIPUS辐照兔骨髓作为干预方法,观察骨髓来源血细胞一白细胞、红细胞及血小板的变化情况,探讨LIPUS能否对化疗后血细胞减少发挥有益的影响。目的:1.研究低强度脉冲超声对阿糖胞苷处理后兔骨髓来源血细胞数量的影响;2.研究低强度脉冲超声对阿糖胞苷处理后兔血小板活化功能的影响。方法:1.20只新西兰兔经耳缘静脉注射阿糖胞苷,剂量为50mg/kg,连续3天。给药期间及给药后,取兔耳中动脉血液,进行血常规检查。2.将20只阿糖胞苷处理后新西兰兔随机分为2组,分别为LIPUS辐照组和对照组,每组10只。LIPUS辐照组对阿糖胞苷处理后的新西兰兔进行连续7天辐照,辐照部位为兔的股骨干骺端,辐照前脱毛备皮。辐照参数为0.2W/cm2,频率为0.6MHz,时间为20分钟。对照组采用假辐照,过程与LIPUS辐照组相同,但不给与超声能量。分别于辐照前,辐照后定期采血进行检测,直至辐照后21天。结果:1.阿糖胞苷处理后,新西兰兔白细胞、血小板数量均出现下降,给药3天后白细胞总数下降与给药前相比具有显著性差异(P<0.05);血小板计数下降与给药前相比具有显著性差异(P<0.05)。红细胞数量下降与给药前相比无显著性差异(P>0.05)。2. LIPUS开始辐照后第3天,LIPUS组白细胞数量与对照组差异无统计学意义(P>0.05),开始辐照后第5、7、11、14、17、21天,LIPUS辐照组白细胞总数显著上升,与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。不同时间点,LIPUS组红细胞数量与对照组相比差异无统计学意义。LIPUS开始辐照治疗后第5天,LIPUS组与对照组的血小板计数均出现显著上升出现峰值,第7天两组血小板数量均出现下降,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。第21天,LIPUS组血小板计数再次上升,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。3. ELISA检测给药前、给药后、辐照后3天、7天兔血清TXB2及GMP-140含量,LIPUS组与对照组的血清TXB2含量相比差异均无统计学意义。LIPUS组与对照组的血清GMP-140含量相比差异均无统计学意义。结论:低强度脉冲超声辐照兔骨髓,可升高阿糖胞苷处理后的白细胞数量,主要表现为中性粒细胞数量的增加。低强度脉冲超声对红细胞数量无影响。低强度脉冲超声对组血小板数量的影响,仅表现在辐照后第7天及第21天与对照组相比差异有统计学意义,但整体水平与对照组相比无明显差异。低强度脉冲超声对血清TXB2及GMP-140有关的活化代谢功能无影响。
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