生物肽—蛋氨酸脑啡肽增强树突状细胞抗肿瘤活性研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zengjinsongduanli
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前言:   树突状细胞(DendriticCell)是目前发现的专职抗原提呈细(Antigen Presenting Cell,APC),它可以特异捕捉抗原,表达高水平的细胞内主要组织相容抗原MHC-Ⅱ类分子和协同刺激分子CD80和CD86,并能移行至淋巴器官,刺激初始型T细胞增殖活化,同时刺激B淋巴细胞增殖成熟,并刺激Th细胞及NK细胞活性。未成熟DC在机体的外周组织中捕获和加工抗原,然后开始向淋巴器官转移,并渐进式成熟,与此同时DC表面重要的功能分子,如:MHC-Ⅱ、CD40和CD80的表达增加。DC参与机体的抗感染免疫及肿瘤免疫应答的过程,在肿瘤免疫治疗研究中,肿瘤细胞与DC融合得到细胞融合疫苗的方案很受重视。蛋氨酸脑啡肽(MethionieEnkePhalin,MENK),是从猪脑提取液中分离出的具有内源性吗啡样活性的物质,MENK通过与免疫细胞上受体结合发挥免疫调节作用,对自然杀伤细胞、单核细胞和细胞因子的释放都有调节作用。那么MENK对DC瘤苗是否也有影响,国内外未见报道。本研究就MENK对小鼠髓系DC2.4细胞株与同种鼠源的淋巴瘤细胞融合成的DC瘤苗的功能进行探讨。   方法:   采用本教研室保存并传代的C57/BL-6小鼠髓系DC2.4细胞株及同源的淋巴瘤细胞进行实验,复苏培养细胞,应用扫描电镜技术、酸性磷酸酶活性检测、流式细胞仪检测技术、酶联免疫吸附试验、MTS方法等检测DC表型和功能的各种指标。长的突起;而未作处理的DC(即RPMI1640组)的突起很短甚至没有突起。   2、MENK处理的DC瘤苗细胞中的酸性磷酸酶活性低于RPMI1640组(P<0.05)。   3、MENK处理DC瘤苗,能够上调DC表面MHC-Ⅱ、CD86分子的表达。   4、MENK处理的DC瘤苗比未做任何处理的对照组(即RPMI1640组)IL-12分泌的量增加。(P<0.05)   5、MENK处理的DC瘤苗,与适宜比例的淋巴细胞培养,可促进淋巴细胞的增殖。   6、MENK处理的DC瘤苗对Rac-1淋巴瘤细胞的特异性杀伤能力比各处理组均增强。   结论:   1、适宜浓度的蛋氨酸脑啡肽显著促进负载Rac-1淋巴瘤抗原的DC2.4形态学的成熟。   2、适宜浓度的蛋氨酸脑啡肽作用负载Rac-1淋巴瘤抗原的DC2.4,使DC2.4细胞内的酸性磷酸酶活性下降,表明DC吞噬抗原能力下降,递呈能力增加,趋向成熟。   3、适宜浓度的蛋氨酸脑啡肽显著增加负载Rac-1淋巴瘤抗原的DC2.4的MHC-Ⅱ类分子和CD86分子的表达,刺激DC发育成熟。   4、适宜浓度的蛋氨酸脑啡肽显著增加负载Rac-1淋巴瘤抗原的DC2.4培养上清中IL-12的含量,说明MENK促进DC2.4成熟的同时,上调DC2.4的功能。   5、适宜浓度的蛋氨酸脑啡肽作用负载Rac-1淋巴瘤抗原的DC2.4,使DC2.4显著促进淋巴细胞增殖,上调DC2.4的功能。   6、适宜浓度的蛋氨酸脑啡肽作用于负载Rac-1淋巴瘤抗原的DC2.4,可显著增强DC2.4诱导活化淋巴细胞对Rac-l淋巴瘤细胞的特异性杀伤活性。
其他文献
目的:   本课题旨在充分利用人类基因组印记基因图谱及国际人类基因组单倍型图(Hapmap)、中国人遗传背景的基因组多态性等大型基因组计划的最新研究成果,初步筛选在中国汉族人