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研究背景:腹膜纤维化是长期腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)的常见并发症。PD治疗3-8年后,腹膜出现纤维化,这是腹膜功能丧失和超滤失败的主要原因。间皮细胞的上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是导致腹膜纤维化和腹膜功能恶化的最初可逆步骤。尽管EMT的潜在机制已成为许多研究的焦点,但目前关于腹膜纤维化中microRNA(miRNA)调控的信息十分有限。MicroRNA-145(miR-145)在很多疾病导致的纤维化中起作用,而且,miR-145在不同组织纤维化中可能有着截然不同的作用。而miR-145在纤维化方面的研究非常有限,而其腹膜纤维化中的作用尚未被研究。研究目的:1、探究miR-145在纤维化的HMrSV5细胞和腹膜组织中的表达变化;2、体外实验中,研究miR-145对EMT和腹膜纤维化的作用和机制;3、腹膜纤维化小鼠体内实验研究miR-145对腹膜纤维化的影响和其潜在的治疗价值。研究方法:用TGF-β1诱导人腹膜间皮细胞(HMrSV5细胞)发生EMT和纤维化之后,检测相应的 EMT 及纤维化指标 Fibronectin 1(FN1),α-smooth muscle actin(α-SMA),E-cadherin(E-cad),collagen Ⅰ alpha 1(Col1α1),FGF10 和miR-145 的表达变化。在HMrSV5细胞中过表达或敲低miR-145后,检测对纤维化及FGF10的影响。用小干扰RNA敲低FGF10,检测对腹膜纤维化的影响。随后的荧光素酶报告基因实验中进一步证实miR-145和FGF10是否存在靶向关系。在腹膜纤维化小鼠的腹膜中,检测miR-145和FGF10的表达情况,并评估腹膜纤维化程度。在腹膜纤维化造模的小鼠腹腔内过表达或敲低miR-145后,检测miR-145过表达或敲低效率,并评估对小鼠腹膜纤维化和腹膜功能的影响。研究结果:我们发现,在体内及体外诱导腹膜纤维化后,miR-145表达量显著升高,FGF10表达降低。过表达miR-145能够促进EMT及腹膜纤维化。miR-145对腹膜纤维化的作用是通过靶向FGF10产生的,miR-145能够互补结合FGF10 mRNA的3’-UIR的特定区域。FGF10在TGF-β1诱导的HMrSV5细胞纤维化和纤维化腹膜中表达量显著降低,FGF10表达下降促进了腹膜纤维化的发生。在小鼠腹腔内注射腹透液促进腹膜纤维化的基础上,加入miR-145过表达质粒能够进一步促进纤维化,而敲低miR-145能够减轻小鼠腹膜纤维化。研究结论:1、在TGF-β1诱导的人腹膜间皮细胞纤维化及小鼠腹膜纤维化后,miR-145表达升高。2、miR-145是腹膜纤维化的促进因子。3、在腹透液诱导的小鼠腹膜纤维化中和在TGF-β1诱导的HMrSV5细胞纤维化的过程中,FGF10表达被抑制。4、FGF10是一种腹膜纤维化的保护因子,其表达减低促进纤维化发展。5、在腹膜纤维化过程中,miR-145通过调节FGF10来促进腹膜纤维化进展。6、miR-145及FGF10是潜在治疗腹膜纤维化的靶点。