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绿原酸(chlorogenic acid,CGA)是金银花等中草药的主要活性成分,具有抗菌消炎、清除自由基、降脂和免疫调节等多种生物学功能。本研究选择同栏舍、同批次、体重相近的健康宁乡阉母猪36头(始重43.25±0.56 kg),随机分为对照组(饲喂基础日粮)和试验组(饲喂基础日粮+100 mg/kg CGA),每组6个重复,每个重复3头,进行饲养试验,试验期8周,探讨日粮添加CGA对宁乡猪肉质和脂肪代谢的影响。试验结果如下:(1)日粮添加CGA有降低宁乡猪平均日采食量的趋势(P=0.064)。CGA对宁乡猪屠宰率、胴体长度和眼肌面积等胴体性状没有显著影响,但有降低平均背膘厚的趋势(P=0.080)。CGA能显著改变宁乡猪肉色,其中显著提高亮度(P=0.004)和黄度值(P<0.001),而显著降低红度值(P=0.014),对肉质其它指标(如p H、滴水损失、熟肉率等)则无显著影响。CGA能降低宁乡猪肌肉中花生四烯酸(C20:4n6,P=0.016)和总多不饱和脂肪酸(PUFA,P=0.087)含量,同时提高油酸(C18:1n9c,P=0.043)和总单不饱和脂肪酸(MUFA,P=0.075)含量。CGA对肌肉Met含量有降低的趋势(P=0.092)。(2)CGA显著降低宁乡猪血清尿素氮(UN,P=0.001)含量,对白蛋白(ALB,P=0.069)、总胆固醇(TC,P=0.065)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,P=0.089)含量也有降低的趋势。CGA显著提高宁乡猪血清Ala(P<0.001)、Gly(P=0.018)、His(P<0.001)、Met(P=0.009)和Leu(P<0.001)含量,对Arg(P=0.090)和Ile(P=0.071)含量也有提高的趋势;而显著降低Asp(P=0.023)和Phe(P=0.037)含量。CGA能显著下调宁乡猪背肌钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白2(SNAT2,P<0.001)和十二指肠Slc7a1 m RNA表达(P=0.009),对空肠Slc1a5 m RNA也有下调表达的趋势(P=0.074)。(3)脂肪酸组成在不同的脂肪组织中,显示出一定程度的组织特异性。CGA对宁乡猪背脂和腹脂中PUFA含量影响较大,而肾周脂(PA)和肠系膜脂肪长链脂肪酸组成无显著影响。CGA能显著提高宁乡猪背脂(DSA)中α-亚麻酸(C18:3n3,P=0.039)比例及背脂和腹脂(ASA)中PUFA比例(P<0.05),尤其是亚油酸(C18:2n6c,P<0.05)。CGA显著下调宁乡猪背脂乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα,P=0.040)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD,P=0.025)和腹脂脂联素(Adipo Q,P=0.024)m RNA表达,对背脂苹果酸酶(ME,P=0.076)、脂肪酸去饱和酶1(FADS1,P=0.070)和腹脂脂肪酸转运蛋白4(FATP4,P=0.063)m RNA也有下调表达的趋势。此外,CGA有下调肾周脂中极长链脂肪酸延长酶2(Elovl2,P=0.071)和Elovl5(P=0.075)m RNA表达的趋势。表明CGA能通过下调脂肪酸合成通路中相关基因的表达,优化背脂和腹脂等组织的长链脂肪酸组成。(4)基于LC-MS的非靶向代谢组学方法,研究了CGA对宁乡猪肝脏内源性代谢的影响。CGA对宁乡猪肝脏中27种代谢物影响最大,显著提高葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)、吲哚-3-羧酸和多种磷脂等,而显著降低亚油酸、赖氨酸和胆碱等;在涉及18条代谢通路中,CGA显著影响亚油酸代谢和赖氨酸降解代谢通路。进一步研究发现,CGA可通过调节3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)、SCD和Elovl5的转录等改善宁乡猪肝脏脂肪代谢。这些结果表明,CGA可能通过对宁乡猪肝脏脂质、氨基酸和葡萄糖等多方向调节,在降脂中发挥重要作用。(5)CGA显著改变了宁乡猪盲肠16种菌属。对群落基因进行功能分类发现,CGA对RNA加工与改性的相对丰度有降低的趋势。CGA有降低宁乡猪盲肠中易诱导脂肪沉积变形菌门(Proteobacteria)的趋势;同时降低了盲肠中乙酸和丙酸的含量,这可能与普雷沃菌(Prevotella)、乳杆菌(Lactobacillus)和瘤球菌(Ruminococcaceae)等菌丰度降低存在联系。这些微生态环境的改变有利于改善宿主脂肪代谢。此外,本研究进一步探索了在日粮中添加2%亚麻油来改善宁乡猪胴体长链脂肪酸谱的途径。与对照组相比,日粮添加亚麻油对宁乡猪的胴体形状和肉品质无显著影响,宁乡猪背肌中C20:1、C18:3n6和C18:3n3含量显著提高(P<0.05),C20:4n6含量显著降低(P<0.05);日粮添加亚麻油对背脂、腹脂和肾周脂中脂肪酸含量的影响趋于一致,如能显著提高背脂、腹脂和肾周脂中C18:2n6c、C18:3n6、C18:3n3、C20:3n6含量(P<0.05),降低背脂和腹脂中C18:1n9c(P<0.05)、C20:4n6(P<0.10)及肾周脂中C18:0含量(P<0.05);同时,日粮添加亚麻油还能显著降低3种脂肪组织中n-6/n-3 PUFA比值(P<0.05),使3种脂肪组织中平均n-6/n-3 PUFA比值降到5.92。进一步研究发现,日粮添加亚麻油能显著下调背脂中ACCα、PPARγ和FADS2 m RNA的表达(P<0.05),对PPARαm RNA的表达也有抑制趋势(P<0.10)。上述结果表明,日粮中添加2%亚麻油能显著提高宁乡猪背肌、背脂、腹脂和肾周脂中C18:3n3含量,使3种脂肪组织中平均n-6/n-3 PUFA比值降至《中国居民膳食指南》(2016)推荐范围(4~6)内;这可能是通过调控脂肪细胞分化及抑制脂肪酸从头合成途径实现的。综上所述,日粮添加CGA降低了宁乡猪血清TC和LDL-C含量,影响宁乡猪氨基酸和脂代谢;调控了肌肉、背脂和腹脂等组织中长链脂肪酸组成和比例,降低了背脂脂肪沉积;CGA通过调控相关基因表达激活肝脏赖氨酸降解和亚油酸代谢等通路,CGA改善了盲肠菌群丰度。此外,日粮添加2%亚麻油可显著提高宁乡猪背肌、背脂、腹脂和肾周脂中C18:3n3含量,及显著降低这3种脂肪组织中平均n-6/n-3 PUFA比值至5.92左右。