急性肺损伤（acute lung injury，ALI）是一种临床上常见的危重症，死亡率高达35％～40％，至今尚无十分有效的治疗药物。目前的研究认为过度的炎症反应和氧化应激是主要发生机制。脓毒血症是引起ALI的主要原因之一。从甘草中分离出来的三萜类有效成分--甘草甜素(glycyrrhizin，GL),具有抗炎、抗病毒、抗癌、抗凝血、免疫调节和抑制自由基的产生等作用。目前，有关甘草甜素对脓毒血症引起的急性肺损伤的作用及机制研究较少。 第一部分、甘草甜素对大鼠脓毒血症引起的急性肺损伤的保护作用 目的：观察甘草甜素对大鼠脓毒血症引起的急性肺损伤的保护作用。 方法：采用尾静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠脓毒血症引起的ALI模型。雄性SD 大鼠30 只,随机均分为5组：正常对照组(CON组)、模型组(LPS组，尾静脉注射LPS 7.5 mg/kg)、GL 处理组(GL1、GL2、GL3组，分别腹腔注射GL 30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg，10 min 后尾静脉注射LPS 7.5 mg/kg)。LPS 注射后12 h，测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、IL-6的浓度、总蛋白的含量，肺组织髓过氧化物酶（MPO）的活性和湿干重比值，并观察肺组织病理学变化。 结果: 与CON组相比，LPS组BALF 中白细胞总数、总蛋白含量、IL-6的浓度，肺组织MPO的活性和湿干重比值明显增加（P<0.05）；LPS组肺组织切片观察见明显的炎细胞浸润、肺泡及间质充血、水肿。与LPS组相比，GL1、GL2、GL3组BALF 中白细胞总数、总蛋白含量、IL-6的浓度、肺组织MPO的活性和湿干重比值均降低（P<0.05）；病理学损伤也减轻。GL3组损伤减轻较GL1、GL2组更为明显（P<0.05）。其中GL3组BALF 中白细胞总数、总蛋白含量、肺组织MPO的活性均低于GL1和GL2组（P<0.05）；GL3和GL2组BALF 中IL-6的浓度低于GL1组（P<0.05）。 结论：GL能够减轻脓毒血症引起的炎性细胞浸润和肺泡毛细血管屏障损伤，从而对ALI具有保护作用，且在30～120mg/kg范围内随剂量增加效果更明显。 第二部分、Toll样受体4在脓毒血症引起的急性肺损伤模型中的表达及甘草甜素对其的影响 目的: 观察大鼠静脉注射LPS后肺组织中TLR4的表达及GL对其的影响。 方法: 采用尾静脉注射LPS 建立大鼠脓毒血症引起的ALI模型。为了观察LPS 注射后不同时间点肺组织中TLR4的表达，雄性SD 大鼠15 只,随机均分为5组：正常对照组(CON组)、LPS模型组I、II、III、IV（I、II、III、IV组，分别于注射LPS 后6h、12h、18h、24h 处死大鼠取肺组织样本）。通过real time PCR和Western boltting方法检测大鼠肺组织中TLR4mRNA和蛋白的表达水平。为了观察GL 对LPS引起的大鼠肺组织中TLR4的表达变化的影响，雄性SD 大鼠15 只,随机均分为3组：正常对照组(CON组)、LPS模型组（LPS组,尾静脉注射LPS 7.5 mg/kg）、甘草甜素处理组（GL组，腹腔注射GL 120mg/kg，10 min后静脉注射LPS7.5 mg/kg）。所有大鼠于12h 后处死，取肺组织用与上述相同的方法检测TLR4mRNA的表达。 结果: 与CON组相比(1.0053±0.4922)，I、II、III、IV组肺组织中TLR4mRNA的表达分别下降至0.7090±0.1022、0.4897±0.0988、0.5627±0.0831、0.3513±0.0622(P＜0.05)。TLR4蛋白表达水平在II、III、IV组均下降。在观察GL 对LPS 引起的大鼠肺组织中TLR4的表达变化的影响的实验中，GL组与LPS组TLR4mRNA的表达分别为0.6118±0.1426、0.5701±0.1334，差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论: 在静脉注射LPS引起的急性肺损伤模型中，肺组织内TLR4mRNA和蛋白的表达均下降，GL 对此未见明显影响。 第三部分、甘草甜素及甘草次酸对HMC-1释放IL-6的影响 目的：观察甘草甜素及甘草次酸对PMA+A23187 刺激肥大细胞引起的IL-6 分泌增加的影响。 方法：实验分别分为5组：对照组（CON组），置于95％O2+5％CO2的细胞培养箱中正常培养；PMA+A23187 刺激组（PA组），加入20nM PMA+0.1μM A23187 孵育7h；甘草甜素处理组（GL1、2、3组）,分别用20mM、50 mM、100 mM 甘草甜素处理1h 后，加入PMA+A23187孵育7h。使用酶联免疫吸附测定法检测细胞培养液上清中IL-6的浓度。甘草次酸的实验使用相同的实验方案。甘草次酸处理组（GA1、2、3组），分别用20mM、50 mM、100 mM 甘草次酸处理1h 后，加入PMA+A23187孵育7h。 结果：与CON组相比，PA组IL-6的浓度显著上升（P＜0.05）。 GL1、2、3与PA组相比未见明显变化。GA1、2、3组IL-6的浓度较PA组均显著下降（P＜0.05），以GA2、3组更为明显（P＜0.05）。 结论：甘草次酸而非甘草甜素可减轻PMA+A23187刺激肥大细胞引起的IL-6分泌增加。提示甘草甜素可能通过其代谢产物甘草次酸抑制炎症介质IL-6的分泌，从而产生抗炎作用。