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玫瑰茄(Hibiscus Sabdariffa L.)是一种天然的具有药食两用价值的营养保健植物,亦是一种传统的经济作物,植物的花萼、种子、茎和叶子均可利用,其中以花萼的干品或鲜品最有价值。玫瑰茄化学成分主要为有机酸、花青素、多酚类、黄酮类、多糖和挥发油等物质。其味酸、性寒,在民间,被普遍当作饮料,具有清热解暑、养颜消斑、减肥消脂、排毒解酒等功效;临床上,玫瑰茄用于利尿降压、抗肿瘤和抗坏血病的治疗,并且对支气管炎和咳嗽有缓解作用,同时可预防神经和心血管疾病。但是,目前对于玫瑰茄挥发油和多糖的研究甚少,本课题系统展开了对玫瑰茄挥发油的提取和成分分析,多糖的提取、分离纯化和结构鉴定,以及对挥发油和多糖的抗炎和免疫等多种生物活性评价等研究。主要研究结果如下:水蒸气蒸馏法(SD)提取挥发油,超声和微波分别对其再处理,以及固相微萃取法(HS-SPME)提取得到的四种挥发油样品。用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对四种挥发油样品进行化学成分分析。结果表明,两种提取方法提取到的挥发油成分和种类都存在较大差异。SD法提取的挥发油成分中共检测出20种挥发性成分,其中含量最高的是棕榈酸(39.19%),HS-SPME法得到的挥发性成分以4-雄烯-11β-醇-3,17-二酮(8.68%)和棕榈酸甲酯(5.65%)为代表,总体种类较少。对挥发油再处理后的样品中主要化学成分的种类和未处理前并无太大差别,仅含量略有不同。对SD法提取到的玫瑰茄挥发油进行抗氧化能力、抗肿瘤、抑菌和抗炎等活性的研究。结果表明:挥发油样品实验浓度的FRAP值均较低,对DPPH和ABTS自由基清除能力也不明显,整体抗氧化能力较差;玫瑰茄挥发油对MCF-7和PC3两株肿瘤细胞增殖的抑制率先呈剂量依赖性升高,达到一定浓度后趋于平稳,500μg/m L时,挥发油对MCF-7和PC3增殖的抑制率分别高达92.41%和86.72%,远优于阳性对照5-氟尿嘧啶(5-FU),而对HepG2细胞增殖抑制作用并不明显;在抑菌实验中,抑菌圈测定结果显示挥发油对不同菌种的抑菌效果存在差异,对金黄色葡萄球菌属于中度敏感,对大肠杆菌和伤寒沙门氏菌属于低度敏感,而对绿脓杆菌和痢疾志贺杆菌不敏感,抑菌效果一般;细胞毒性评价,以及对NO释放的抑制作用测定显示HSO-Ⅲ既无毒性,又有很好的NO释放抑制率,基因、蛋白深入研究发现,HSO-Ⅲ可以有效抑制TNF-α、iNOS、IL-1、IL-6和COX-2 m RNA的表达和细胞因子IL-1和IL-6的分泌;此外,HSO-Ⅲ可显著抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞中激活的磷酸化的ERK1/2、JNK和P65蛋白的表达,提示HSO-Ⅲ可能通过阻断NF-κB P65和MAPK信号通路发挥显著的抗炎功效。玫瑰茄干花萼经水提醇沉法提取、脱色、脱蛋白、除杂后,得淡棕色玫瑰茄粗多糖,提取率为9.782%,DEAE-52离子交换树脂分离纯化后得到水洗、0.1、0.2和0.3 mol/LNaCl四个洗脱梯度的多糖组分。理化指标测定分析HSP-Ⅰ、HSP-Ⅱ、HSP-Ⅲ和HSP-Ⅳ都不含有淀粉,总糖含量依次为:86.21%、83.16%、89.36%、78.99%;蛋白含量依次为:10.76%、7.78%、4.96%、0.33%;糖醛酸含量依次为:21.08%、39.73%、61.64%、72.75%。经过GPC分析,四个多糖组分的图谱均为单一对称峰,峰位分子量依次为:8733Da、14190Da、444080Da、137448Da。红外光谱显示四种多糖在3393~3398cm-1区间有O–H伸缩振动、在2927~2932 cm-1区间有C–H伸缩振动、在波数1417 cm-1处有羧基(–COOH)的C–O伸缩振动,判断四种多糖为均一多糖。结构分析显示HSP-Ⅲ含有糖醛酸,鼠李糖,甘露糖,葡萄糖,半乳糖,且单糖摩尔比为1∶10.98∶3.28∶1.23∶8.68。高碘酸氧化和Smith降解结果表明HSP-Ⅲ中含有可被氧化的(1→6)、(1→)、(1→2)糖苷键(65.71%)以及不可氧化的(1→3)糖苷键(34.29%)。核磁共振结果显示HSP-Ⅲ中含有α、β两种吡喃糖苷键型,由4种单糖单元组成,主链应为(1→6)和(1→)。对玫瑰茄多糖进行抗肿瘤,小鼠脾细胞增殖实验,及对RAW264.7巨噬细胞免疫活性研究。结果表明,HSP-Ⅱ、HSP-Ⅲ和HSP-Ⅳ可以显著抑制MCF-7和HepG2细胞的增殖,且都显示出良好的浓度梯度依赖关系,但仅有HSP-Ⅳ对PC3细胞增殖显示出较好的抑制效果,与之相反的是,HSP-Ⅰ反而可以非常显著的促进MCF-7、HepG2和PC3三株细胞的增殖;HSP-Ⅱ、HSP-Ⅲ和HSP-Ⅳ对脾细胞增殖有一定的促进作用,三者协同ConA还可显著促进脾T淋巴细胞的增殖,HSP-Ⅰ和HSP-Ⅳ分别协同LPS可显著促进脾B淋巴细胞增殖(P<0.001),提示玫瑰茄多糖的活性成分协同ConA或LPS,可通过促进脾T和B淋巴细胞的增殖,增强淋巴细胞的免疫调节功能,进而改善机体的免疫水平;此外,HSP-Ⅱ可显著促进NO、TNF-α和IL-6的释放和RAW264.7细胞iNOS、IL-1β和IL-6 mRNA的表达,提示其可能通过激活NF-κB信号通路发挥免疫调节作用。