论文部分内容阅读
近年来福建省有不少关于双生病毒的报道,被侵染的植物主要有:烟草、辣椒、番茄、棉花等作物,胜红蓟、醴肠、艾草、叶下珠、赛葵等杂草以及庭院观赏植物三角梅等。我们从福建省仙游县和永安市采集了呈双生病毒典型病症的赛葵和醴肠样品,分别提取其总DNA,用双生病毒的简并引物扩增到了病毒基因组的部分序列。序列测定和分析表明:从样品中检测到的病毒为赛葵曲叶病毒(Malvastrum leaf curl virus, MaLCV)和空心莲子草黄脉病毒(Alternanthera yellow vein virus, AlYVV)。其中分离物F1属于MaLCV,分离物F2属于AlYVV。由福建仙游县呈现叶片卷曲和叶脉增厚病症的赛葵( Malvastrum coromandelianuml)植株中分离得到F1。全序列测定表明F1 DNA-A全长共2748个核苷酸,包含6个开放阅读框,为典型的旧世界双生病毒。通过基因组比对发现,F1与赛葵曲叶病毒(Malvastrum leaf curl virus, MaLCV)福建分离物(MaLCV-[CN:Fj])的序列相似性最高,为96%;与广东赛葵曲叶病毒(Malvastrum leaf curl Guangdong virus, MaLCGdV)福建分离物(MaLCuGdV-FJ3[CN:Fj])的序列相似性为92%;与MaLCGdV广东分离物MaLCuGdV-GD6[CN:Gd]和MaLCuGdV-GD9[CN:Gd]的序列相似性皆为88%;与广东番木瓜曲叶病毒( Papaya leaf curl Guangdong virus, PaLCGdV )广东分离物PaLCuGuV-GD2[CN:Gd]的相似性为94%,福建分离物PaLCuGuV-[CN:Fj]的相似性为93%;与中国番木瓜曲叶病毒广州分离物PaLCuGuV-GZ[CN:Gd]的相似性为94%;而与其他双生病毒基因组序列的相似性不高,最高为85%,最低为78%。这表明F1是MaLCV的一个新分离物(MaLCV-[XY])。由福建永安市呈现黄脉症状的醴肠(Eclipta prostrate)中分离得到了F2。病毒全序列测定表明F2 DNA-A全长含2745个核苷酸,共编码6个蛋白,为典型的旧世界双生病毒。通过基因组比对发现,F2与AlYVV的中国福建分离物AlYVV-[F30]的序列相似性为97%;与福建分离物AlYVV-[F31]、AlYVV-[F22]、AlYVV-[LC1]的相似性为96%;与AlYVV的中国广东分离物AlYVV-[Gd]的序列相似性为96%;与AlYVV的中国广西分离物AlYVV-[Gx]的相似性为95%,与AlYVV的越南分离物AlYVV-[Vn]的相似性为95%,而与其他种双生病毒的各地分离物的序列相似性较低,最高仅为78%,最低为74%。因此,我们认为F2是AlYVV在福建的一个新分离物(AlYVV-[YA])。我们通过重组DNA的方法构建了MaLCV的侵染性克隆,经农杆菌接种侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)、番茄(Lycopersicon esculentum)、三生烟(Nicotiana tobacum)的健康植株,并以表现典型叶片卷曲和叶脉增厚病症的本氏烟饲养烟粉虱,利用饲过毒的烟粉虱接种健康的赛葵。注射接种的本氏烟的上部叶片呈现明显的叶向上卷曲,叶脉增厚,植株矮化;番茄叶片微卷,三生烟没有观察到任何症状;经粉虱传毒的赛葵上部叶片表现轻微上卷。