【摘 要】
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目的:本课题主要探讨电压门控钠通道亚型Nav1.8的表达对大鼠泌乳素瘤MMQ细胞增殖、凋亡及激素分泌的影响。方法:首先,构建目的基因SCN10A（编码Nav1.8）敲减的慢病毒干扰载体sh RNA,并培养大鼠泌乳素瘤MMQ细胞系。然后,将培养的MMQ细胞分为敲低组和对照组,用慢病毒干扰载体sh RNA分别进行转染。转染72小时后观察慢病毒上报告基因GFP（绿色荧光蛋白）的表达情况,荧光率大于80%
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目的:本课题主要探讨电压门控钠通道亚型Nav1.8的表达对大鼠泌乳素瘤MMQ细胞增殖、凋亡及激素分泌的影响。方法:首先,构建目的基因SCN10A（编码Nav1.8）敲减的慢病毒干扰载体sh RNA,并培养大鼠泌乳素瘤MMQ细胞系。然后,将培养的MMQ细胞分为敲低组和对照组,用慢病毒干扰载体sh RNA分别进行转染。转染72小时后观察慢病毒上报告基因GFP（绿色荧光蛋白）的表达情况,荧光率大于80%者进入后续实验。最后,采用RT-q PCR及Western-blot技术检测SCN10A基因敲减效率。CCK8法测定细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,ELISA法测定MMQ细胞泌乳素（PRL）水平。结果:shRNA干扰MMQ细胞中SCN10A表达后,敲低组与对照组相比,SCN10A的m RNA及其编码的蛋白Nav1.8表达量降低（P<0.05）。细胞增殖活性降低（P<0.05）,凋亡率增高（P<0.05）,分泌泌乳素水平降低（P<0.05）。结论:本研究结果表明,电压门控钠通道亚型Nav1.8的表达可能促进了垂体泌乳素瘤的发生、发展,有望为垂体泌乳素的治疗提供感兴趣的分子靶点。
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