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目的:乳腺癌(breast cancer)是威胁妇女健康的主要恶性肿瘤,全球每年大约有一百万妇女患病,我国乳腺癌的发病率一直居女性肿瘤的首位,并且发病年龄年轻化、发病率呈逐年递增的趋势,成为城市中死亡率增长最快的癌症。随着对乳腺癌分子生物学的广泛研究,对乳腺癌组织标本的需求日益增长。以往研究者通常是根据某个研究课题的需要,进行临时的肿瘤标本收集,使得大量的有价值的肿瘤标本和相关资料流失,给肿瘤的深入研究带来极大的损失。本课题拟建立人乳腺癌组织资源库,收集、保存乳腺癌组织标本,汇总病人各类信息和数据,为广大的医学科研人员开展乳腺癌临床和基础研究提供重要的信息平台。方法:(1)运用Windows2000系统制定出人乳腺癌组织资源库构建的操作流程及各个技术环节的标准操作程序(Standard Operation Procedure, SOP),为建立规范化、标准化的肿瘤组织库奠定科学的基础。(2)由病理医生对手术后乳腺癌组织进行诊断用常规取材,通过对组织进行固定、包埋、切片、制成蜡块,常规苏木素-伊红(hematoxylin and eosin, HE)染色和免疫组织化学染色,对乳腺癌几个特异性生化指标包括雌激素受体(estrogen receptor, ER)、孕激素受体(progesterone receptor, PR)、CerbB-2/HER 2进行判断,建立石蜡包埋的乳腺癌组织库。(3)病理医生常规取材后,余下的新鲜肿瘤组织切成0.5cm3左右的小块,分装于不同的冻存管中,作好标记后放置于-80℃冻存。其中取一部分组织按照制定的标准化操作程序,进行RNA及蛋白质的提取,并分别对其进行质量检测,再作好记录及标记后冻存,由此建立新鲜乳腺癌组织库和乳腺癌生物分子数据库。(4)采集病人抗凝血5ml,3000g离心3min后,分别收集血清及血细胞,同时进行质量检测,作好标记后冻存于-80℃低温冰箱。(5)运用Windows2000系统,设计各项Excel信息表格,收集病人各种基本信息(包括临床、病理信息)和随访信息,建立乳腺癌信息数据库,便于研究者查询,为临床治疗提供支持;同时设计了《妇女乳腺健康调查表》,通过收集乳腺癌患者的个人史和既往史等相关信息,方便今后流行病学调查取证。结果:(1)制定了乳腺癌组织资源库的操作流程图,组织样本采集SOP、条码标签设定规范、DNA、RNA、蛋白质提取的SOP,以及血液样本采集的SOP;(2)病理组织常规HE染色显示所取组织为乳腺癌组织,免疫组织化学染色结果显示ER、PR阳性定位于细胞核,CerbB-2/HER 2阳性定位于细胞膜,三者均为黄色、棕黄色、黄褐色颗粒,阳性率视病人不同而不同;(3)乳腺癌组织所提取DNA的OD260/OD280比值均在1.8-2.0之间,所提取RNA的琼脂糖凝胶电泳图谱显示18s和28s两条带,其中28s条带的亮度是18s的1.5-2倍,表明冻存的新鲜乳腺癌组织各种生物分子完整未降解,质量较好,适用于各种研究;(4)乳腺癌患者血液提取DNA的OD260/OD280比值均在1.8-2.0之间,血清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示蛋白条带清晰,表明冻存的血液标本质量较好,可作为科学研究样本;(5)制定了各项Excel信息表格和《妇女乳腺健康调查表》,有利于规范化采集与汇总病人病理、临床及基础方面的各类信息,为今后进行乳腺癌的基础与临床研究,进行大规模流行病学筛查提供可靠的数据支持。结论:初步构建了人乳腺癌组织资源库的建设框架,包括:石蜡包埋的乳腺癌组织库、新鲜乳腺癌组织库、乳腺癌生物分子数据库、乳腺癌信息数据库。目前已收集人乳腺癌组织标本110例,质量控制严格,经细胞、分子生物学检验显示符合各项研究要求,可望为乳腺癌的早期预防、早期诊断和寻找个体化的治疗方法提供重要的生物资源。