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1.柳生金针菇（Flammulina rossica）为我国新记录菌种。朱宴妍等研究发现,柳生金针菇胞外粗多糖具有免疫及抗肿瘤活性,其FREPs对肝癌小鼠的免疫网络有广泛的影响,但作用的机制尚不明确。本文从细胞信号角度综述免疫炎症的发生、发展及其治疗靶点,系统整理免疫相关细胞因子,细胞发生免疫炎症所激活的信号通路,为确定药物作用的靶点、攻克疾病的发生机理及新药的开发利用提供理论依据。2.为提高FRPs产量,经过单因素试验及正交优化试验,对其发酵培养条件优化。选取浸提时间、浸提温度及液料比3个要素,以菌丝体多糖提取率为指标,采用L3（3）试验确定多糖提取的最佳工艺。结果表明,适宜柳生金针菇深层发酵的培养条件为:装液量120mL/250mL、接种量10%、培养温度23℃、培养箱转速150r/min。菌丝体多糖提取的最佳工艺条件为:浸提时间2h,液料比50:1,浸提温度90℃,最佳工艺路线为:热水浸提2h,过滤,合并3次提取液,旋转蒸发仪浓缩发酵液至原体积的1/10,4倍体积无水乙醇4℃醇沉24 h,3500r/min离心5 min后,收集沉淀,-80℃预冻过夜,真空冷冻干燥,称重,再次溶解多糖,离心去沉淀,上清液醇沉,再次冷冻干燥,得菌丝体多糖（FRIPs）,计算得多糖提取率为74.39%。3.通过对正常BALB/c小鼠进行药理实验,对FRPs免疫调节作用进行研究,探讨其多糖发挥免疫作用的机制。通过体外脾淋巴细胞增殖试验证明,FRPs与ConA协同刺激小鼠脾淋巴细胞增殖分化,并且随剂量增加,OD值逐渐上升,多糖0.8 ug/mL及1.6 ug/mL剂量组与正常组相比,存在极显著性差异（p<0.01）。体内药理实验检测FRPs不同剂量组对小鼠脾脏和胸腺指数的影响,流式细胞仪检测CD4+、CD8+,ELISA试剂盒检测小鼠血清中淋巴因子IL-6、单核因子IL-1β、肿瘤坏死因子TNF-α、转化生长因子TGF-β含量的变化,Western blot条带光密度试验显示,不同剂量组FRPs对小鼠脾组织IκBα、P-IκBα、P-NF-κBp65和NF-κBp65 4种因子的表达产生影响,与正常组相比,FRIPs高剂量组IκBα差异性显著（p<0.05）,明显低于正常组,FRPs多糖不同剂量组P-IκBα表达量明显增加,与正常组相比极显著性差异（p<0.01）;与正常组相比,FRIPs高剂量组和FREPs低剂量组NF-κBp65呈现极显著性差异（p<0.01）,FRIPs高剂量组NF-κBp65比值下降并且低于正常组,FRPs多糖不同剂量组P-NF-κBp65均呈现极显著性差异（p<0.01）,均高于正常组。4.通过对BALB/c小鼠建立免疫抑制模型,建立体内药理药效实验,研究FRPs免疫作用,探讨其多糖发挥免疫作用的机制。测定不同剂量组小鼠胸腺及脾脏指数,由实验结果得,与模型组相比FRPs剂量组能明显提高小鼠免疫抑制小鼠胸腺及脾脏指数。ELISA试剂盒检测小鼠血清中淋巴因子IL-6、单核因子IL-1β、肿瘤坏死因子TNF-α、转化生长因子TGF-β含量的变化。流式细胞仪检测各分组小鼠脾淋巴细胞亚群细胞因子CD4+、CD8+及CD4+/CD8+含量变化,FRIPs高剂量组可极显著性提高CD4+含量（p<0.01）,极显著性降低CD8+含量;通过提高CD4+含量与减少CD8+含量,共同提高CD4+/CD8+比值;FRIPs低剂量组CD8+含量升高,CD8+/CD4+比值升高,差异性极显著（p<0.01）;FRIPs中剂量组CD4+含量降低,差异性显著（p<0.05）。Real-time PCR分析小鼠胸腺组织细胞因子mRNA表达量,选取ACTB、GAPDH、HPRT1、EEF1A跨内含子引物为内参,与此同时,提取小鼠小肠DNA,与反转录产物同时进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,基因组测序,排除DNA干扰,计算结果。5.应用Western blot条带光密度分析FRPs不同剂量组对免疫抑制小鼠胸腺组织蛋白质表达量的影响。与正常组相比,模型组P-IκBα、IκBα、NF-κBp65、P-NF-κBp65 4种因子表达量差异性极显著（p<0.01）,说明BALB/c小鼠CTX免疫抑制模型造模成功。与模型组相比,FRPs不同剂量组均呈现极显著性差异（p<0.01）,证明多糖及阳性药物均对CTX免疫抑制小鼠产生药理效果;模型组小鼠受到CTX刺激,自身免疫遭到破坏,IκB被IKK磷酸化并降解,最终导致NF-κBp65的活化,磷酸化的NF-κBp65入核,IκB磷酸化留在细胞质中,IκB是NF-κBp65的抑制蛋白质,FRPs上调IκB的表达,进而抑制NF-κBp65活性,发挥药理效果。模型组NF-κBp65表达量下调,部分NF-κBp65磷酸化入核,IκB磷酸化降解;与模型组相比,NF-κBp65表达量上调,并且随剂量的增加,磷酸化NF-κBp65表达量上调幅度增加（p<0.01）。本实验结果显示,FRPs通过调节IκBα和NF-κBp65磷酸化发挥免疫调节作用,这为研究和开发FRPs免疫调节作用提供了理论依据,也将有助于设计治疗特定人类疾病的工具。