甘草是我国大宗药材之一，其药材基源为豆科植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、光果甘草(Glycyrrhiza.glabra L.)和胀果甘草(Glycyrl-hiza.infiata Batal.)的根和根茎。但甘草属植物物种较多，全球约有20个物种，我国就有8种，但并非所有的甘草属植物都适合作为药用;另外，早年间甘草自然资源丰富且分布较广，由于各地甘草生态条件复杂，不同产地问的种质资源在数千年流转中又交流频繁，导致甘草属植物的遗传差异较大，药用物种变种较多;此外，建国后由于甘草用途广出口量大，野生甘草资源被大量挖掘，使得市场在供不应求的状态下向栽培甘草发展，而栽培甘草的药用价值相比野生甘草略显逊色并且更容易出现变种，致使该属药用甘草系统分类不清;同时，各地民间用药习惯差别较大，甘草药用情况混乱，严重影响了临床用药的安全性和有效性，以上原因导致甘草市场现状混乱。尽管在以往的甘草研究中，科研工作者对甘草进行了系统分类研究，但所得出的结论并不一致，且随着物种的不断进化和演变，新物种是否出现尚待考察。为保证甘草药材产业化生产的良好发展、确保甘草药材质量以及临床用药的安全性和有效性，本研究以采集自我国不同地区以及中亚部分国家的166份甘草为材料，采用建立同时测定14种化学成分的含量和双波长HPLC指纹图谱的方法，从化学成分层面上探讨甘草属药用亲缘关系。
　　1、以100份国内不同产地采集的7种表观鉴定到种的甘草样本为研究对象，建立同时测定14种化学成分含量的方法，并测定了100份甘草样本中14种化学成分的含量。明确了光甘草定是光果甘草所特有的成分;并发现甘草香豆素不仅仅甘草含有，黄甘草和粗毛甘草中也检测到甘草香豆素的存在;7种基源甘草中只有光果甘草、刺果甘草、云南甘草不含有半甘草异黄酮B;甘草查尔酮A在不同基源甘草中的含量波动性很大，在种间分布没有规律性，检测的100份样本中唯有胀果甘草样本(12份)均含有甘草查尔酮A。
　　2、以已鉴定到种的100份样本为研究对象，建立了甘草、光果甘草、胀果甘草的双波长HPLC指纹图谱。在265nm HPLC指纹图谱中甘草有40个共有峰，光果甘草有34个共有峰，胀果甘草有34个共有峰;在365nm HPLC指纹图谱中甘草有18个共有峰，光果甘草有17个共有峰，胀果甘草有14个共有峰。本文建立的双波长指纹图谱方法检测的共有峰较多，能够较为全面的概括三种基源甘草中的化学成分信息。
　　3、基于上述建立的两种方法(建立同时测定不同基源甘草中14种化学成分的含量和建立不同基源甘草的双波长HPLC指纹图谱)对100份不同基源甘草样本药用亲缘关系进行研究。100份7种基源甘草中14种化学成分的含量聚类结果表明，非药用甘草物利喷甘草、粗毛甘草和3种药用甘草(甘草、光果甘草和胀果甘草)之间的亲缘关系较近，但黄甘草、粗毛甘草与刺果甘草、云南甘草的亲缘关系较远。分别基于265nm HPLC指纹图谱和365nm HPLC指纹图谱的色谱峰进行聚类分析，发现两种波长下，黄甘草都与三种药用甘草聚为一支，说明黄甘草与三种药用甘草的亲缘关系很近。
　　4、基于上述建立的两种方法(建立同时测定不同基源甘草中14种化学成分的含量和建立不同基源甘草双波长HPLC指纹图谱)对66份未知甘草样本进行鉴别和药用亲缘关系研究。两种方法均能准确的对未知甘草进行鉴别，且鉴别结果一致。结果表明:本实验中采自国内的23份未知甘草样本鉴别结果与初步表观鉴定结果一致，且均与三种药用甘草亲缘关系相近。采自国外的43份未知甘草样本大部分含有光果甘草双波长HPLC指纹图谱共有峰(包括光甘草定)，故鉴定国外甘草大部分为光果甘草，且均与三种药用甘草亲缘关系相近。统观这66份样本中甘草苷和甘草酸的含量，发现国外43份未知甘草中甘草酸的含量远远高于2015版《中国药典》规定的下限值，但是甘草苷的含量偏少，有些样本并不符合药典要求;国内23份未知甘草的甘草苷和甘草酸的含量均符合药典规定。
　　本文建立的两种方法(建立同时测定不同基源甘草中14种化学成分的含量和建立不同基源甘草双波长HPLC指纹图谱)能从化学成分的种类和含量层面上明确了与三种药用甘草亲缘关系相近的种。实验结果均表明黄甘草与三种药用甘草的亲缘关系相近，可能成为药用甘草的备用替代品。两种化学方法对粗毛甘草的统计结果有所差异，但在建立的两种检测方法下，粗毛甘草与甘草的化学成分相似，也可能为药用甘草的备用替代品。本研究为扩大药用甘草资源、解决甘草资源短缺，保证甘草临床用药的安全性和有效性提供了参考。