金属离子与拟南芥钙调素的结合及离子竞争

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钙调素广泛存在于动植物体内,它不仅作为胞内钙授体介导多种生物生物学功能,而且近来已证明,它还可以作为一种广谱多肽第一信使产生多种生物学功能,并且有跨膜及胞内信号转导机制。但是随着环境污染的加剧,以及稀土离子在农业上的广泛应用,金属离子被越来越多的引入到生物链中。而一些离子半径与钙离子相近的金属离子有可能与CaM结合并对Ca2+·CaM中的Ca2+产生竞争,从而对钙调素功能产生影响。利用灵敏度高的线形扫描极谱法或离子电极法研究了Cd2+,或Pb2+与CaM的结合及离子竞争。概括起来有以下几方面: 1.首次报道用单扫描极谱法测定了Cd2+在不同pH条件下与CaM的结合。证明,在pH=6.5时,Cd2+在CaM中有10个结合位点;当pH=4.5时,Cd2+在CaM中只有4个结合位点。这一方法可用于CaM的浓度测定,CaM下限可低至10-8数量级,是目前CaM测定方法灵敏度最高的。 2.首次报道用Cd2+极谱探针法研究了其它金属离子与CaM的结合及竞争结合情况。结果表明,pH6.5时,Ca2+,Mg2+,Sr2+,Ba2+主要与CaM的主结合位点结合,而Cu2+,Zn2+,La3+则既可与CaM主位点结合又可与CaM辅位点结合。其中,Ca2+的结合力在主位点比Cd2+的大,而Ba2+,Sr2+,Mg2+则比Cd2+的弱。而La3+与CaM结合力最强。pH4.5时,Ca2+与CaM的结合力较Cd2+的弱。La3+的结合力比Cd2+的稍强。 3.首次报道用Pb2+选择电极法,研究了Pb2+与CaM的结合平衡,并结合Excel规划求解法处理数据,求解了Pb2+-CaM的一系列平衡常数,即:Pb2+在CaM中有约11个结合位点,其中有4~5个强结合位点,5~6个弱结合位点。结合常数分别为:K1=2.62×107,K2=3.75×107,K3=1.03×107,K4=1.85×107,K5=2.53×106,K6=8.07×105,K7=3.36×105,K8=2.76×105,K9=2.22×105,K10=3.96×104,K11=3.72×104。 摘要 4.用高灵敏度的钙离子选择电极研究了C扩十与拟南芥CaM及花椰菜的结合平衡,并结合Excel规划法、单线形法、网格法等数据处理方法。研究了C犷气CaM的结合平衡。结果说明,Excel规划法,及单纯形法解析数据时,初值对解的影响较大。而网格法的解析不受初值影响。本文还探讨了网格法与Excel规划求解结合,或网格法与单纯形结合法解析数据的优点。
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