三种前列腺特异性抗原肿瘤标志物电化学传感器的制备

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本文利用纳米材料(金纳米粒子和银纳米粒子/纳米簇),DNA杂交链式反应作为信号放大策略制备了三种电化学免疫传感器实现对PSA高灵敏检测。
  第一章:前列腺特异性抗原(PSA)分析进展。
  第二章:设计了一种基于功能化的金纳米粒子作为信号放大的电化学PSA免疫传感器。信号探针采用亚甲基蓝作为信号分子吸附于DNA-二抗功能化金纳米粒子表面,将一抗组装于金纳米粒子修饰的玻碳电极表面,当PSA抗原存在时,形成抗体-抗原-信号探针三明治型夹心型结构。差示脉冲伏安技术记录其在pH7.4PBS的传感信号,传感信号的变化与PSA含量有关。试验条件(pH及孵育时间)进行了优化。在最佳条件下,传感器的线性范围为1pgmL-1至75ngmL-1,此外该传感器PSA具有良好的选择性、稳定性和重现性。
  第三章:利用DNA连续杂交反应,制备了较长的DNA杂交链;合成了带正电荷的银纳米粒子(Ag NPs),将其负载到DNA串联体上作为信号探针。选择合适的引物将其连接于二抗,通过建立抗体-抗原-抗体三明治结构,最后将信号探针通过杂化连接到三明治结构。差示脉冲伏安技术记录AgNPs的氧化峰信号,其峰电位为+0.09V(vs SCE)。在最佳条件下,传感器的线性范围为0.1pgmL-1至75ngmL-1,检出限为0.033pgmL-1。该传感器用于血清样品PSA(加标)检测,回收率97.5%-104%。
  第四章:选择了一种以富含C碱基的DNA作为模板原位合成银纳米簇作为信号探针。首先将二抗与富含C碱基DNA通过交联反应形成二抗复合物,通过特异性识别,形成“一抗-抗原-二抗复合物”三明治结构,利用硼氢化钠还原硝酸银于DNA模板上原位合成银纳米簇。采用差示脉冲法记录银纳米簇的氧化信号作为传感信号,传感器的线性范围为1pgmL-1-100ngmL-1,,其检测限为0.33pgmL-1。
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