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血管紧张素转化酶(ACE)将血管紧张素I转化为血管紧张素Ⅱ,还可以催化舒缓激肽的分解,导致血压升高。通过抑制血管紧张素转化酶的活性,可以达到降低血压的效果。水解植物蛋白,筛选具有ACE抑制活性的水解物,这方面的研究成为热点。本文比较了pH stat法、TNBS法和OPA法测定油菜蜂花粉蛋白的水解度,选用pH stat法测定油菜蜂花粉蛋白的水解度。水解120min时,0.5mg/mL水解物对ACE的抑制率达到55.24%,水解度为8.97%。应用酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶水解油菜蜂花粉,水解物对ACE均有抑制作用,其水解物对ACE的IC50分别为0.67mg/mL、0.55mg/mL、0.46mg/mL、0.35mg/mL。氨基酸分析显示,蜂花粉和水解物中疏水氨基酸占总氨基酸的45.02%、49.43%,其中丙氨酸占总氨基酸的6.06%、6.73%,脯氨酸占总氨基酸的5.12%、13.12%。水解物通过膜过滤分离,浓度为0.5mg/mL时,1500Da～5000Da水解物的ACE抑制率和得率都是最高的,ACE抑制率达到54.83%,得率为57%;大于5000Da水解物的ACE抑制率为49.64%,得率为5%;300Da～1500Da水解物的ACE抑制率为42.72%,得率为36.55%;小于300Da水解物的ACE抑制率仅为5.78%,得率为1.5%。四种蛋白酶的水解物经过凝胶分离,发现ACE抑制活性较强的组分主要集中在70 min和120min之间,对应的分子量在146Da和1355Da之间。碱性蛋白酶水解物分离组分ACE抑制率最大,达到90%以上。油菜蜂花粉蛋白水解物经过凝胶层析分离,得到六个组分,均有ACE抑制活性。其中,P-1、P-2和P-3与水解物相比,ACE抑制活性提高,总得率为80.6%;P-2对ACE的抑制活性最强,ACE抑制活性的IC50为90μg/mL,得率为23%;其次是P-3,ACE抑制活性的IC50为120μg/mL,得率为21.8%;P-4、P-5和P-6组分与水解物相比,ACE抑制活性下降,总得率为17.1%。油菜蜂花粉凝胶层析组分P-2经过制备型反相高效液相分离得到7个组分,各分离组分ACE抑制活性不同。H-5对ACE抑制活性最强,IC50为10μg/mL;其次是H-3,IC50为30μg/mL;H-2、H-4和H-6组分ACE抑制率分别为24.39%、14.08%和33.17%;H-1和H-7没有ACE抑制活性。由于H-3和H-5组分对ACE抑制活性较强,需要进一步的研究。油菜蜂花粉蛋白水解物经过加热处理,20min以内,水解物ACE抑制率为49%,下降了3.4%。水解物经过胃蛋白酶消化8小时,水解物ACE抑制率为37%,下降了27%。水解物经过胰蛋白酶消化8小时,水解物ACE抑制率为21%,下降了58%。