胎盘间充质干细胞条件培养基对离体牙牙周膜细胞活性影响的研究

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目的:牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)的活性是牙齿再植术后牙周组织修复与再生的关键所在。离体时间和储存介质是影响PDLCs活性的重要因素。牙齿发生全脱出后,长时间体外暴露,特别是干燥环境会对PDLCs产生不可逆的损伤。将全脱出牙齿储存在适宜的介质中,维持PDLCs活性,对再植后实现牙周膜愈合具有重要意义。对全脱出牙齿储存液的研究是牙外伤领域的重点问题之一。Hank’s平衡盐溶液(Hank’s balanced salt solution,HBSS)是国际牙外伤协会推荐的储存液,能够在一定时间内维持细胞活性,但其临床应用并不广泛。胎盘间充质干细胞条件培养基(placenta-derived mesenchymal stem cell-conditioned medium,PMSC-CM)中含有多种胎盘间充质干细胞分泌的生长因子,能够促进细胞增殖迁移和损伤修复。本实验比较PMSC-CM和HBSS对PDLCs活性的影响,评估PMSC-CM是否可以作为一种新型的全脱出牙齿储存液,为寻找新型全脱出牙齿储存液提供实验基础和理论依据。研究方法:收集因正畸治疗需要而拔除的前磨牙,随机放入HBSS及PMSC-CM中室温储存6 h、12 h、24 h(n=10),全牙消化法提取离体牙PDLCs,流式细胞术检测其凋亡情况,数据采用SPSS 22.0软件进行统计学分析,两两比较采用LSD-t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果:室温下,离体牙牙周膜细胞的凋亡率及坏死比例随时间延长而上升,储存时间为6 h,12 h时,HBSS组与PMSC-CM组PDLCs早期凋亡率,细胞坏死率及细胞存活比例无显著性差异(P>0.05);24 h时,PMSC-CM组PDLCs细胞凋亡率及坏死比例明显低于HBSS组,细胞存活比例显著高于HBSS组(P<0.01)。结论:与HBSS相比,PMSC-CM能够在较长时间内维持离体牙牙周膜细胞的活性,抑制细胞坏死与凋亡,有望作为一种新型的全脱出牙齿储存液应用于临床。
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