病毒性巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ N-端肽对乳腺癌细胞miRNA表达谱的影响

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目的:阐明病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ(Virus macrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N末端21个氨基酸的多肽(NT21MP)对乳腺癌细胞miRNAs表达谱的调控研究。方法:将乳腺癌MCF-7细胞株分组为:空白组(B)、SDF-1α组(S)和SDF-1α+NT21MP(N)三组,待细胞长至70%-80%密度时,分别于各组加入PBS、SDF-1α、NT21MP放置4℃,30min,其中N组NT21MP加入放置4℃,30min后,然后再加入SDF-1α刺激,置于CO2恒温培养箱。各组细胞24 h后用Trizol提取总RNA,经逆转录后采用miRNAs qPCR Arrays检测乳腺癌相关miRNAs。收集各组细胞抽提RNA,RNA质量评估后逆转录cDNA。采用染料法(SYBR Green I)进行相对定量分析,实验设计是按照2-△△Ct解析法来进行设计,检测各组间miRNA表达谱的差异。结果:总共检测了168个miRNAs基因,以上调>2倍或下调<0.5倍筛选。相对于SDF-1α组,NT21MP组升高的有9个:miR-223、miR-451a、miR-128、miR-489、miR-141、miR-320a、miR-155-3p、miR-335、miR-320e,降低的有2个:miR-15a、miR-339。结论:筛选得到NT21MP调控miRNA的差异表达谱,其可能与NT21MP抗乳腺癌作用相关。
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