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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是一种非甾体类真菌毒素,也称F-2毒素。ZEN主要由禾谷镰刀菌产生,广泛存在于谷类作物及其副产品中,如玉米、花生及商业性饲料等,从而影响饲料的产量和质量。ZEN耐热性质稳定,经过饲料加工也不会发生降解,通过食物链进入人体,严重危害人和动物的健康。目前ZEN的降解方法主要分为物理法、化学法和生物降解法。物理法处理虽然会达到高效的降解率,但经处理后会破坏食品和饲料的营养物质,化学法处理往往会造成二次污染等弊端,因此生物降解法成为当下研究热点。本研究采集发霉饲料、粪便和土壤等样品以ZEN为唯一碳源筛选降解菌株;研究其降解菌株的生物学特性和降解特性;优化菌株的降解条件并用于污染饲料脱毒。具体研究结果如下:1.通过采集霉变饲料、土壤、粪便等样品,将样品稀释后取上清液接种到以ZEN为唯一碳源的培养基,挑取能够生长的单菌落,以降解率为标准进行复筛,采用ELISA法筛选对ZEN的降解能力较强的菌株。采用形态学和分子生物学方法对菌株进行鉴定,确定其属种。结果表明从96个分离菌株中筛选出2株ZEN降解能力较强的菌株L-9和G-6,降解率分别为91.14%和81.19%。细菌形态和16S r RNA鉴定L-9菌株为贝莱斯芽孢杆菌,G-6菌株为解淀粉芽孢杆菌。2.对L-9和G-6菌株进行部分生物学特性研究和降解特性研究。L-9和G-6菌株均在12 h达到最大活菌数,活菌数测定分别8.91×10~7cfu/m L和8.15×10~8cfu/m L;L-9和G-6菌株分别在50℃、60℃、70℃、80℃水浴30 min,其存活率分别为77.38%、60.37%、36.81%和16.74%和33.04%、18.08%、11.27%、2.05%;L-9和G-6菌株培养基盐浓度为7%时,菌株的存活率分别在17.83%和8.06%;L-9和G-6菌株以0.1%、0.2%和0.3%牛胆盐测定其活菌数,其存活率分别为73.45%、69.56%、38.21%和67.89%、53.25%、24.35%;研究L-9和G-6菌株分别在AFB1、DON、OTA中的降解效果,其降解率分别为91.16%、94.41%、21.46和20.41%、24.26%、14.47%。降解特性研究结果表明,L-9和G-6菌株降解ZEN的机制主要包括细胞壁吸附和酶降解,酶降解是主要的降解途径。细胞壁吸附活细胞和灭活细胞均有吸附作用,对ZEN降解不同活性成分进行研究,胞外酶是主要的降解途径。3.优化L-9和G-6菌株的降解条件以及在饲料原料和污染黄贮对ZEN的降解。结果表明L-9菌株最佳降解条件为:温度37℃,培养基p H值7.0,接种量3%,培养时间48 h;G-6菌株最佳降解条件为:温度37℃,培养基p H值5.0,接种量3%,培养时间72 h。将优化条件运用于不同饲料原料和污染黄贮中,结果证明,L-9和G-6菌株均能100%降解可溶性淀粉、玉米粉、豆粕粉中的ZEN;在污染黄贮中,L-9菌株降解率为76.25%,G-6菌株降解率为83.59%。