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目的:了解乙肝病毒基因型、变异位点1762/1764和1896、c-myc蛋白与肝细胞癌的关系,进一步探讨肝癌的发病机理,为肝癌的防治及早期诊断提供理论依据。方法:采用核酸扩增荧光定量及测序法检测正常人、慢性HBV携带者、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌患者共80例血清标本的病毒基因型及变异,在自动基因分析仪上进行测序,用定量法及Chromas程序对结果进行判断;采用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测HBV DNA定量;采用免疫组织化学方法检测上述5组肝组织中c-myc蛋白的表达情况,用半定量积分法进行结果判断;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清抗原抗体标志物。所有的数据均采用SPSS17.0统计软件包对检测数据进行统计学处理。结果:1、在78例慢性HBV感染者中基因B型为31例,占39.7%(31/78),基因C型为47例,占60.3%(47/78),本研究未发现其他基因型。基因C型在ASC、CHB、 LC、HCC四组中所占比例分别为42.9%(6/14),50.0%(15/30),64.3%(9/14),85.0%(17/20),差异有统计学意义(χ2=8.29,p=0.04)。在LC组和HCC组,C基因型比例占绝大多数,但两者基因型分布差异无统计学意义(p=0.161),将二者合并(26/34)与CHB组、ASC组合并(21/44)相比较,差异有统计学意义(#=6.62,p=0.01),提示LC、HCC两组中C基因型所占比例高于CHB、ASC两组。2、在78例慢性HBV感染者中,共有51例发生BCP变异,44例发生PC变异。在ASC、CHB、LC、HCC四组中,基因C型HBV感染者发生BCP变异的病例数所占比例分别为50.0%(3/6),86.7%(13/15),88.9%(8/9),94.1%(16/17),发生PC变异的病例数所占比例分别为33.3%(2/6),80.0%(12/15),88.9%(8/9),88.2%(15/17),两种变异均多于基因B型感染者,除ASC组外,差异均有统计学意义(p<0.05)。3、c-myc蛋白的表达,以HCC组最高(阳性率75.0%),其次是LC组(64.3%)、CHB组(53.3%)、ASC组(42.9%),组间比较差异有统计学意义(p<0.05)。将HCC、LC组相加(70.6%)与ASC、CHB组相加(50.0%)后比较发现,c-myc蛋白在二者中的表达差异有统计学意义(p<0.05),且c-myc蛋白在HCC组、LC组病例中强阳性表达多于CHB组和ASC组。4, ASC、CHB、LC和HCC组基因C型HBV感染者c-myc蛋白的阳性表达率分别为83.3%(5/6),80.0%(12/15),88.9%(8/9),88.2%(15/17),均大于基因B型感染者c-myc蛋白的阳性表达率,即12.5%(1/8),26.7%(4/15),20.0%(1/5),0%(0/3),差异有统计学意义(p<0.05)。各组中,c-myc蛋白阳性表达的HBV感染者发生BCP变异的比例分别为66.7%,75.0%,77.8%,86.7%,均高于BCP非变异者所占比例,发生PC变异的比例分别为50.0%,68.8%,77.8%,66.6%,除ASC组外均高于PC非变异者所占比例,但差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1、本次研究慢性HBV感染者(包括慢性乙肝病毒携带者、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌)的基因型有B型和C型,以C型为主,未发现其它基因型。慢性HBV感染者基因型与临床疾病谱有关,C基因型与较为严重的疾病(乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌)有关。2、各组中基因C型的BCP、PC变异多于基因B型。3、c-myc蛋白的表达,以HCC组最高,其次是LC组、CHB组和ASC组。而且HCC、 LC两组c-myc蛋白强阳性表达的病例数明显多于CHB、ASC两组。4、各组中,基因C型的c-myc蛋白表达阳性率明显大于基因B型,并且c-myc蛋白表达阳性的慢性HBV感染者发生BCP、PC变异明显。c-myc蛋白的表达与C基因型有相关性,与BCP及PC变异是否有关尚待扩大病例数进一步研究证实。5、HBV基因C型、BCP和PC变异、c-myc蛋白与HCC的发生发展有关系,但三者在HCC发生发展过程中是否有协同关系,是否与疾病进展有关,及促进HCC发生的具体机制还有待于扩大病例数和研究范围深入研究。