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目的:探索壳聚糖和酵母多糖对白色念珠菌的作用,并以壳聚糖和酵母多糖为原料制备微球,考察壳聚糖-酵母多糖微球对大鼠白色念珠菌肺炎的疗效。方法:1.采用XTT减低法评价壳聚糖对96孔培养板内白色念珠菌生物膜的生长阶段活性的影响。以荧光显微镜、扫描电镜观察壳聚糖对生物膜内死活菌和形态结构的影响。不同浓度的酵母多糖注射于大鼠体内,提取所有大鼠肺组织内总RNA并利用PCR技术检测Dectin-1(Dentritic cell-associated C-type lectin-1)的表达。2.采用乳化交联法,对药物比、油水比、搅拌速度、交联剂、交联时间几项因素进行分析,选出优于制备微球的条件。通过扫描电镜和红外光谱对所制微球性质和表面形态进行分析。3.建立免疫低下大鼠肺部感染白色念珠菌模型,随机分组为模型组、壳聚糖组、联合用药组和微球组。分别给予相应药物治疗后,HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化。Real-time PCR检测Dectin-1、TLR2(Toll-like receptor2)mRNA的表达, ELISA检测IL-10、TNF-α水平。结果:1.0.0313%壳聚糖对白色念珠菌浮游菌和早期生物膜有明显的抑制作用。随着生物膜的成熟,0.0625%壳聚糖才能够显著地抑制生物膜生长。通过荧光显微镜和扫描显微镜下观察0.0625%壳聚糖能有效杀死生物膜内菌体并延缓生物膜形成。低中高浓度的酵母多糖能上调大鼠体内Dectin-1的表达,但高浓度酵母多糖可能引起全身炎症反应。2.用乳化交联法制备微球操作简单且稳定。在药物比为3:2,油水比为8:1,搅拌速度为600rpm,以戊二醛饱和的甲苯溶液作为交联剂条件下,所制微球通过电镜观察表面成球型,分散性好,大小基本均匀,红外光谱证实壳聚糖-酵母多糖微球内壳聚糖和酵母多糖交联成功。3.自制壳聚糖-酵母多糖微球应用于感染白色念珠菌肺炎的大鼠体内,壳聚糖-酵母多糖微球组肺组织炎症明显减轻,且体内Dectin-1、TLR2、IL-10水平明显较模型组和壳聚糖组升高。而壳聚糖-酵母多糖微球组体内TNF-α水平明显较模型组降低。结论:1.壳聚糖具有杀灭白色念珠菌和抑制起生物膜形成的作用。酵母多糖对大鼠体内Dectin-1具有上调作用。2.乳化交联法制备微球工艺简单。经过优化后工艺稳定适合制备微球。3.壳聚糖酵母多糖微球能显著提高感染白色念珠菌肺炎的大鼠体内Dectin-1、TLR2表达,促进IL-10分泌并调节抑制TNF-α,以达到抗白色念珠菌肺炎的作用。