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近年来我国奶牛单产大幅提升,奶牛中尤其高产奶牛的营养代谢类疾病发病率也逐年跃升,奶牛机体代谢稳态维持机制的破坏是代谢疾病发生的一个重要原因。应激是奶牛机体稳态维持的一项重要机制,目前奶牛代谢应激方面的研究主要集中于热应激、运输应激、密度应激等方面。作为细胞代谢过程中一种重要物质基础,氧气在泌乳奶牛代谢稳态和泌乳调节中发挥的作用研究较少。因此,本研究通过检测不同奶产量荷斯坦奶牛血液和牛奶中乳腺氧代谢、氧化应激状态、乳腺血管生成以及血液健康相关细胞因子的相关参数,结合乳腺中氨基酸和葡萄糖吸收情况,初步探索乳腺氧供给对泌乳奶牛代谢应激状态的影响,为维持高产奶牛代谢稳态理论的完善提供理论依据。1.不同奶产量的奶牛乳腺氧代谢和健康状态的比较研究本试验目的是研究不同泌乳性能荷斯坦奶牛乳腺氧代谢特征及其与乳腺氧化应激间的关系。研究选取18头高产泌乳奶牛(奶产量55.65±3.95 kg/d)和16头低产奶牛(奶产量12.27±4.70kg/d),在同一时间采集上述34头奶牛的乳静脉、尾动脉和尾静脉的血液,进行血气参数、血常规、氧化应激指标、血管生成、氨基酸等相关指标的检测;同一时间采集各头奶牛的奶样,进行乳成分、氧化应激指标和氨基酸等指标检测;并结合上述结果计算乳腺氧气供给等氧代谢指标。结果表明,高产奶牛乳腺总氧消耗量显著高于低产奶牛(P=0.01);乳静脉和尾动脉血氧含量,以及单位奶产量所需消耗的氧气量均显著低于低产奶牛(P<0.01)。乳静脉中应激和血管生成指标方面,与低产奶牛相比,高产奶牛乳静脉中的T-AOC(P=0.01)含量显著高于低产奶牛,而ROS(P=0.09)、MDA(P=0.07)、HMOX-1(P=0.06)、HIF-1α(P=0.14)、ORAC(P=0.07)、GSH-Px(P=0.06)、iNOS(P=0.12)和eNOS(P=0.10)含量具有升高趋势。乳中相关指标与乳静脉指标类似,发现高产奶牛乳中MDA(P=0.01)和T-AOC(P=0.03)高于低产奶牛;而乳中ORAC(P=0.07)、GSH-Px(P=0.06)、SOD(P=0.07)、HIF-1α(P=0.14)具有上升趋势。从乳腺对氨基酸和葡萄糖吸收的情况来看,高产奶牛乳腺的总氨基酸吸收量和单位氧消耗条件下的氨基酸吸收量均高于低产奶牛(P<0.05);而高产奶牛尾动脉和乳静脉葡萄糖含量均显著低于低产奶牛(P<0.01);相反,乳腺葡萄糖吸收率(P<0.01)和单位氧消耗条件下乳腺葡萄糖吸收率(P<0.01)则显著高于低产奶牛。与低产奶牛相比,高产奶牛乳腺的氧化应激和抗应激水平较高,这与其对氨基酸、葡萄糖等营养素的快速吸收代谢以及乳腺中单位奶产量氧气消耗量较低有关。2.不同乳腺氧耗条件下高产奶牛乳腺代谢应激及潜在健康风险分析通过试验一,我们发现,高产奶牛乳腺的氧化应激水平较高,也具有潜在缺氧的风险。但是在高产奶牛群体中,乳腺氧消耗量不同,是否会影响其应激水平、代谢稳态和健康风险,仍有待探究。因此,本研究通过分析和比较高产高氧耗(HYHC,n=9)和高产低氧耗(HYLC,n=9)奶牛的生产性能、血常规、乳腺应激、血气和血液健康相关细胞因子等指标,初步探索氧供给对奶牛乳腺健康状况的影响。结果显示,HYHC和HYLC奶牛的奶产量和乳成分均无显著差异(P>0.05);HYHC奶牛尾动脉氧含量(P=0.03)和动静脉氧浓度差(P<0.01)均显著高于HYLC奶牛。乳腺应激参数方面,HYHC奶牛乳静脉中ROS(P=0.01)、MDA(P=0.01)、ORAC(P=0.03)、HIF-1α(P=0.08)、HMOX-1(P=0.03)和eNOS(P=0.03)显著低于HYLC奶牛;与HYLC奶牛相比,HYHC奶牛乳静脉中GSH-Px呈下降趋势(P=0.13)。类似的,HYHC奶牛乳中ROS(P=0.03)、MDA(P=0.07)、GSH-Px(P=0.03)、SOD(P=0.15)和 T-AOC(P=0.01)也显著低于HYLC组奶牛。两组奶牛乳腺对各种氨基酸和葡萄糖的总吸收量无显著差异(P>0.15),但HYLC奶牛乳腺单位氧耗条件下氨基酸和葡萄糖的吸收量均高于HYHC奶牛(P<0.01)。两组奶牛乳静脉血中的细胞因子(IL-1α、IL-1β、IL-8、IL-6和TNF-α)无显著差异(P>0.15)。产奶量相同的高产泌乳奶牛,HYLC奶牛的氧化应激水平高于HYHC的奶牛,且可能处于相对缺氧状态,但从血常规和细胞因子变化程度来看,HYLC奶牛无健康风险。综上,高产奶牛乳腺总氧耗较高但单位奶产量氧耗较低,这是由高产奶牛血流量、奶产量和血氧浓度共同决定的;同时,高产奶牛乳腺存在代谢低氧风险,并成为导致其乳腺代谢应激上升和健康风险增加的原因。通过比较不同乳腺氧耗量的高产奶牛乳腺的氧化应激、营养素代谢和血气相关参数,我们推测乳腺低氧耗可能是导致高产奶牛乳腺应激的直接原因,但乳腺低氧耗对高产奶牛泌乳持续力和其他经济指标的影响及其作用机制,仍有待进一步研究。