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目的:在有生育需求的人群中,卵巢低反应患者日益增多,针灸在促进卵泡发育、提高卵母细胞质量等方面有确切疗效,但其深层作用机制尚无突破进展。本研究构建卵巢低反应小鼠模型,评估移植前针刺干预对卵巢低反应小鼠卵巢储备功能的影响,并探究针刺对小鼠卵母细胞在表观遗传学上是否有印迹基因甲基化状态的改变,以期为针刺提高IVF-ET效果的作用机制探明方向。方法:本研究将雌性成年C57 BL/6N小鼠随机分为4组:促排组(CP组)、针刺促排组(CA组)、造模促排组(CM组)、造模针刺促排组(MA组)。在适应性喂养后,对各组先后进行相应雷公藤或生理盐水灌胃造模及针刺干预,干预后以PMSG、h CG促排,取14-16小时卵母细胞进行计数及单细胞甲基化测序,从而比较不同组别卵母细胞总数及其第二次减数分裂中期卵母细胞(MII卵)占比,分析各组卵细胞Mest/Peg1、Igf2r、Peg3、Snrpn等印迹基因甲基化水平的差异。结果:各组小鼠经促排取卵后,在镜下观察计数获卵总数与MII卵数,经统计分析后发现:(1)与促排组(CP组)相比,针刺促排组(CA组)获得的MII卵数及成熟卵母细胞占比(即MII卵占比)无显著差异(P>0.05),但获卵总数显著低于CP组(P<0.05)。(2)造模促排组(CM组)及造模针刺促排组(MA组)获卵总数与MII卵数均显著低于CP组(P<0.05),但CM组成熟卵母细胞占比显著低于CP组P<0.05),而MA组成熟卵母细胞占比与CP组无显著差异(P>0.05)。(3)与MA组相比,CM组在获卵总数、MII卵数、成熟卵母细胞占比方面均较低,差异具有统计意义(P<0.05)。(4)与MA组相比,CA组在获卵总数、MII卵数、成熟卵母细胞占比方面均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,印迹基因Mest/Peg1、Igf2r、Peg3、Snrpn在各自片段内DMR的分布情况经统计分析后发现:(1)与CP组相比,CA组在Mest/Peg1、Igf2r、Snrpn片段内DMR甲基化水平均显著下降(P<0.05)。(2)与CP组相比,CM组在Mest/Peg1片段内DMR甲基化水平显著下降(P<0.05)。(3)与CA组相比,MA组在Peg3片段内DMR甲基化水平显著下降(P<0.05)。(4)与CP组相比,MA组在Mest/Peg1、Igf2r、Peg3片段内均有DMR甲基化水平显著下降(P<0.05),同时发现一段DMR中CP组甲基化水平显著低于MA组(P<0.05)。(5)CM组与MA组之间未发现DMR(P<0.05)。结论:1、移植前针刺干预对卵巢低反应小鼠确有显著疗效,其主要作用机制在于增强卵巢储备功能,提高其卵母细胞质量。此外,针刺干预也可使正常小鼠卵巢储备功能下降,其机制可能与应激作用有关。2、移植前卵巢低反应小鼠的针刺疗效机制与印迹基因Mest/Peg1、Igf2r、Peg3、Snrpn的甲基化修饰无关,但针刺对小鼠的应激作用,可能通过抑制Mest/Peg1、Igf2r、Snrpn甲基化修饰途径来促成。