铁皮石斛原球茎功能活性研究

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铁皮石斛是我国珍稀名贵中药,具有独特的药用价值,但由于其市场需求量大、生长条件特殊,导致其资源紧缺、价格昂贵。铁皮石斛原球茎是植物组织培养技术获得的组织培养物,具有繁殖速度快和成本低等优势。为了解决铁皮石斛资源紧缺的难题,本文以铁皮石斛原球茎为原料,制定了铁皮石斛原球茎质量标准;并进行了初步的功能活性研究,包括以黑腹果蝇为研究对象的抗氧化、延缓衰老功效的研究,和以小鼠为研究对象的改善睡眠功效的研究,旨在为铁皮石斛原球茎的开发应用提供理论依据。首先,通过对不同批次铁皮石斛原球茎感官指标、薄层层析、粗多糖、醇溶物含量测定结果的分析比较,制定铁皮石斛原球茎的质量标准:铁皮石斛原球茎粗多糖含量应不低于8%,醇溶物含量应不低于6.5%。其次,进行了铁皮石斛原球茎体内抗氧化功效研究。第一,通过果蝇生存实验、体内生化指标及抗氧化酶基因表达的测定研究铁皮石斛原球茎对果蝇寿命和抗氧化酶系统的影响。结果表明,铁皮石斛原球茎能延长果蝇寿命,提高果蝇体内SOD、CAT活性,降低LF含量。果蝇体内抗氧化酶mRNA的荧光定量PCR实验结果表明,铁皮石斛原球茎能够提高果蝇体内Cu,Zn-SOD、 Mn-SOD、 CAT的]mRNA基因表达。第二、建立紫外线和D-半乳糖损伤模型,利用果蝇生存实验和生化指标测定研究铁皮石斛原球茎对紫外线和D-半乳糖损伤的拮抗作用。结果表明,与模型对照组相比,铁皮石斛原球茎剂量组果蝇寿命延长,抗氧化酶活性提高,LF含量降低,说明铁皮石斛原球茎对紫外线和D-半乳糖损伤具有一定的拮抗作用。第三、通过双氧水和百草枯急性实验研究铁皮石斛原球茎对羟基自由基和超氧阴离子自由基损伤的保护作用,结果表明,铁皮石斛原球茎各剂量组均能延长果蝇平均寿命与最高寿命。再次,通过小鼠戊巴比妥钠睡眠实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验探讨铁皮石斛原球茎改善睡眠功效。结果表明,铁皮石斛原球茎能够延长戊巴比妥钠睡眠时间、提高阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率、缩短巴比妥钠睡眠潜伏期,但无直接睡眠作用,说明铁皮石斛原球茎具有良好的改善睡眠作用。综上,铁皮石斛原球茎具有一定的抗氧化和改善睡眠作用。
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